9L/lacZ大鼠膠質(zhì)肉瘤細胞
名稱 | 9L/lacZ (大鼠膠質(zhì)肉瘤細胞) (種屬鑒定正確) |
別稱 | 9L/LacZ |
種屬 | 大鼠 |
年齡(性別) | 雄性 |
組織來源 | 腦,膠質(zhì)細胞 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
背景描述 | The cells constitutively express the lacZ reporter gene product, E. coli derived beta-gal, as revealed on tissue sections by histochemical stain, and single tumor cells can be identified.Lymphocytes and other responding cells can be identified by double labeling with antibodies on the same slide.The contrast between stained cells and background facilitates image analysis.The beta-gal expression is very stable, but cells may need to be re-cloned after months of growth in culture. |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | DMEM+10%FBS+1%P/S |
推薦傳代比例 | 1:4-1:8 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
致瘤性 | Yes, forms tumors in the brains of CD Fischer 344 rats |
基因表達情況 | beta galactosidase (beta-gal) |
保藏機構(gòu) | ATCC; CRL-2200 |
二、細胞培養(yǎng)操作
1) 復(fù)蘇細胞:以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
三、培養(yǎng)注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議 1:2 傳代。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
AIF ELISA Kit | 丙型流感病毒RT-PCR試劑盒 |
Tomoregulin(TR)ELISA Kit | 人免疫缺陷病毒1型M群H型RT-PCR試劑盒 |
ANG-R-Tie1 ELISA Kit | 蜜蜂微孢子蟲通用PCR檢測試劑盒 |
HSF1 ELISA Kit | 人科研通用PCR檢測試劑盒 |
Smad7 ELISA Kit | 肺炎支原體/肺炎衣原體雙重PCR試劑盒 |
Ai-Double Stranded DNA Aibody(Ai-dsDNA)ELISA Kit | 偽牛痘病毒PCR試劑盒 |
androgen ELISA Kit | 小泰勒蟲PCR試劑盒 |
Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit | 放線共生放線桿菌PCR試劑盒 |
ai-Gliadin aibody IgA ELISA Kit | 非洲豬瘟(ASFV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
Total bile acide,TBA ELISA Kit | 小反芻獸疫通用型/疫苗株(PPR-U/ PPR-V)雙重核suan檢測試劑盒 |
androgen ELISA Kit | sPECAM-1/sCD31 小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細胞粘附分子1ELISA檢測試劑盒 |
TLX1 Neighbor(TLX1NB)ELISA Kit | ANX-Ⅴ 小鼠膜聯(lián)蛋白ⅤELISA檢測試劑盒 |
Topoisomerase III(TOP3)ELISA Kit | 9L/lacZ大鼠膠質(zhì)肉瘤細胞優(yōu)球蛋白(EL)ELISA試劑盒 |
ai-Epstein-Barr virus aibody,EBV ELISA Kit | APC 小鼠活化蛋白CELISA檢測試劑盒 |
angiotensinogen,aGT ELISA Kit | apo-A1 猴載脂蛋白A1ELISA檢測試劑盒 |