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貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
AS632177 | 單寧含量測(cè)試盒(比色法) | 100管/96樣 |
AS632177 | 單寧含量測(cè)試盒(比色法) | 50管/48樣 |
正式測(cè)定前取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義:
單寧是一類廣泛存在于植物體內(nèi)的多元酚化合物,又稱植物多酚。具有化學(xué)性質(zhì)和多種生理活性,如能與蛋白質(zhì)、生物堿、多糖結(jié)合;能與多種金屬離子發(fā)生絡(luò)合或靜電作用;具有止血、抑制微生物、抗過(guò)敏、抗突變、抗腫瘤、抗衰老等生理活性。
測(cè)定原理:
單寧在堿性環(huán)境下與磷鉬酸反應(yīng),生成藍(lán)色化合物,在760nm處有最大吸收峰。
需自備的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一:液體4mL× 1瓶,4℃保存;
試劑二:液體3mL × 1瓶,4℃保存;
單寧的提取:
按照組織質(zhì)量(g):蒸餾水體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL蒸餾水),充分勻漿后轉(zhuǎn)移到EP管中,80℃水浴提取30min, 8000 g,25℃離心10 min,取上清液待測(cè)。
測(cè)定步驟:
1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至760nm處,蒸餾水調(diào)零;試劑一和試劑二37℃預(yù)熱10min以上;
2、操作表:
試劑名稱(µL) | 對(duì)照管 | 測(cè)定管 |
樣本 | 5 | |
蒸餾水 | 135 | 130 |
試劑一 | 35 | 35 |
混勻,室溫靜置5min
試劑二 | 30 | 30 |
混勻,室溫靜置30min,760nm處讀取吸光值A(chǔ),ΔA=A測(cè)定-A對(duì)照,對(duì)照管只要做一管。
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