本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
AS632175 | 總巰基測(cè)試盒(比色法) | 100管/48樣 |
AS632175 | 總巰基測(cè)試盒(比色法) | 50管/24樣 |
注意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
生物體內(nèi)巰基主要包括巰基和蛋白質(zhì)巰基。前者不僅能夠修復(fù)氧化損傷的蛋白質(zhì),而且參與活性氧清除,后者對(duì)于維持蛋白質(zhì)構(gòu)象具有重要作用。通過測(cè)定總巰基含量和GSH含量,能夠間接測(cè)定蛋白質(zhì)巰基含量。
測(cè)定原理:
巰基基團(tuán)與5,5’-二硫代-雙-硝基苯甲酸(DTNB)反應(yīng),生成黃色化合物,在412nm處有最大吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品:
天平、研缽、恒溫水浴鍋、酶標(biāo)儀、96孔板、乙醇和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體18mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體1mL×1管,4℃避光保存。
樣品的制備:
按照組織質(zhì)量(g):水體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL蒸餾水)進(jìn)行冰浴勻漿,然后8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
血清,培養(yǎng)液:稀釋5倍后測(cè)定,可取0.1mL樣本,加入0.4mL蒸餾水,混勻,置冰上待測(cè)。
操作步驟:
酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長至412nm。
操作表
在96孔板中加入如下試劑
對(duì)照管 | 測(cè)定管 | |
樣品(μL) | 40 | 40 |
試劑一(μL) | 150 | 150 |
試劑二(μL) | 10 | |
乙醇(μL) | 10 | |
混勻,25℃靜置10min,測(cè)定412nm吸光值。ΔA=A測(cè)定-A對(duì)照。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。 |
計(jì)算公式:
總巰基標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 1.8111x - 0.0037,R2 = 1,x為標(biāo)品濃度,單位μmol/mL,y為吸光度ΔA。
1. 組織:
(1)按樣本重量計(jì)算
總巰基含量(μmol/g 鮮重)=(ΔA+0.0037)÷1.8111×V樣總÷W
=0.552×(ΔA+0.0037)÷W
(2)按樣本蛋白濃度計(jì)算
總巰基含量(μmol/mg prot)=(ΔA+0.0037)÷1.8111×V樣總÷Cpr
=0.552×(ΔA+0.0037)÷Cpr
2. 血清、培養(yǎng)液:
總巰基含量(μmol/L)=(ΔA+0.0037)÷1.8111×5×103
=2761×(ΔA+0.0037)
V樣總:加入提取液體積,1mL;W:樣品質(zhì)量,g ;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;5:血清,培養(yǎng)液等液體樣本稀釋倍數(shù);103 :1mmol/ L=103μmol/ L
注意事項(xiàng)
檢出限為10μmol/L。
公司正在出售的產(chǎn)品:
GAD ELISA Kit | Ⅲ型前膠原羧基端原肽ELISA試劑盒 |
anti-hepatitis B virus e antibody,HBeAb ELISA Kit | B淋巴細(xì)胞抗原ELISA試劑盒 |
ATP合mei8ELISA試劑盒 | CDCP1ELISA試劑盒 |
CC趨化因子受體7ELISA試劑盒 | EB病毒IgGELISA試劑盒 |
大鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)試劑盒 ELISA | 大鼠α葡萄糖苷mei(a-Glu)ELISA檢測(cè)試劑盒 |
鈣蛋白mei抑su抗體ELISA試劑盒 | 雞胰島su樣生長因子1(IGF-1)試劑盒ELISA |
人巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA檢測(cè)試劑盒 | Cullin2蛋白ELISA試劑盒 |
豬血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒 | 枝孢霉通用PCR試劑盒 |
蛤弧菌PCR檢測(cè)試劑盒 | 頭孢霉屬通用PCR試劑盒 |
山羊皰疹病毒通用PCR試劑盒 | 鼠呼腸孤病毒3型RT-PCR試劑盒 |
瘰疬分支桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 | 含麩質(zhì)谷物源性PCR試劑盒 |
液化沙雷菌PCR檢測(cè)試劑盒 | HSP-70 大鼠熱休克蛋白70ELISA檢測(cè)試劑盒 |
BCR 人B細(xì)胞受體ELISA檢測(cè)試劑盒 | 海豹分枝桿菌PCR試劑盒 |
Bcl-2 豬B細(xì)胞淋巴瘤因子2ELISA檢測(cè)試劑盒 | 同山羊關(guān)節(jié)炎腦脊髓炎病毒梅迪維斯納病病毒PCR檢測(cè)試劑盒 |
胰蛋白(PANCPIN)ELISA試劑盒 | B7-2/sCD86 牛可溶性白細(xì)胞分化抗原86ELISA檢測(cè)試劑盒 |