(半) 自動熒光體視顯微鏡 Leica M205 FA 和 Leica M205 FCA
當您試圖尋找越來越微弱的熒光信號時,是否有時會有種在夜里釣魚的感覺?明亮的高分辨率圖像是現(xiàn)代發(fā)育生物學和研究的。
Leica Microsystems 開發(fā)的 M205 FA 和 M205 FCA 熒光體視顯微鏡,可讓您在早期輕松檢測 GFP 和 mCherry 等轉基因表達,從而選出合適的樣品,為您的成功奠定基礎。
*的 2 合 1 篩選和成像解決方案
在此之前,您可能不得不在兩個系統(tǒng)之間來回切換:一個可手動縮放,篩選快速,操作直觀,另一個是可觀察和采集圖像中微弱信號的解決方案。
Leica M205 FCA 熒光體視顯微鏡將兩個系統(tǒng)合二為一,組成具有成像能力、超級快速的手動篩選顯微鏡。
現(xiàn)在,一切功能盡在掌控:
● 所有參數(shù)始終自動保存,獲取的結果極其可靠,可即時發(fā)布。
● 四位編碼的濾片轉換器,保持工作流程持續(xù)不中斷。
● 新增了腳踏開關,可輕松切換濾片,調焦和照明,釋放您的雙手,讓您專注于篩選
探索自動化研究的世界——Leica M205 FA 全自動熒光體視顯微鏡
Leica M205 FA 開啟了熒光顯微學研究的新世界,例如,可讓您在無菌操作柜中工作
● 輕松處理復雜的多通道熒光成像過程
● 使用自動縮放、濾片轉換器、熒光強度管理系統(tǒng) (FIM) 和可變光闌執(zhí)行嚴苛實驗
● 獲取載物臺級高分辨率:Leica LMT 260 掃描載物臺可以亞微米級精度放置您的樣品,固定生命細胞培養(yǎng)裝置
明亮的熒光信號 – 始終如一
要檢測微弱的樣品信號,您需要大能量熒光激發(fā)光來發(fā)出明亮的熒光染料信號。但熒光激發(fā)光可能引起反射,導致黑色背景模糊,妨礙熒光信號的檢測。
徠卡的三光路技術 三光路技術引入了第三個光學變倍,可*消除這種背景“噪聲”。它將熒光激發(fā)光與兩個觀察通道隔離開來,無需使用分色鏡。由此,便可以在無噪聲的黑色背景上得到清晰強烈的熒光信號。
精細的三維細節(jié)
您是否認為在顯微學中,高分辨率和高景深是不可調和的一對矛盾?我們用事實證明并非如此!Leica Microsystem 的 FusionOptics 融合光學技術 將兩條光路用于不同任務,克服了光學限制:
● 右側通道以盡可能大的數(shù)值孔徑提供高清晰度圖像
● 左側通道以高景深呈現(xiàn)圖像
結果:您將看到細節(jié)非常豐富,同時又有極大景深的圖像
體視顯微鏡的分辨率
辨認細微結構在研究中至關重要,特別是處理小生物體時。根據(jù)數(shù)字分辨率標準 ISO18221,Leica M205 FA 和 M205 FCA 可實現(xiàn)高達 1279 lp/mm 或 0.78 um (0dB 截止頻率) 的分辨率。
2.0x PlanApo 物鏡是一件光學杰作。它的孔徑高達 0.35 – 這是迄今為止體視顯微鏡所能實現(xiàn)的較大數(shù)值孔徑 (NA)。它比人類紅血球直徑的十分之一還要小。
Neuronal cell culture stained with DAPI, beta III Tubulin–Cy2, Nestin-Cy3 (LMS Bioanalytik GmbH, Magdeburg, Germany). Blue indicates the nuclei of the cells, green neurons expressing beta III Tubulin, and red stem cells expressing Nestin. Image was acquired with a M205 FCA stereo microscope, LMT260 x/y stage, DFC3000 G microscope camera and Fluocombi III at 400x.
速度是關鍵 – 編碼來助力
圖像編碼提供方便、可復制的設置,輕松快速實現(xiàn)歸檔。
集成編碼可將可變光闌的放大倍率和位置實時傳送給軟件??潭葪l以透明方式疊加在實時圖像中,在放大倍率發(fā)生變化時同步更新。當保存圖像時,所有設置隨圖像一起保存,您可隨時調用。
● 編碼組件提供簡單易用、可靠的結果,即使未經過培訓的操作者也能輕松掌握
● 顯微鏡系統(tǒng)智能鏈接到軟件,無需手動調節(jié)校準,輕松更改設置
● TL5000 Ergo 透射光底座可根據(jù)放大倍數(shù)自動適配孔徑,提供理想對比度
2x CORR 物鏡 – 的清晰度
使用 Leica PLAN APO 2.0x CORR 物鏡,輕松調節(jié)折射率 – 即使樣品和物鏡之間有 5 mm 的水柱,也能得到銳利圖像。物鏡讓水如同無物,方便用戶觀察和歸檔樣品。
當觀察浸沒在水溶液中的樣品時,結構容易變得模糊,特別是在高放大倍率下。這是因為空氣 (折射率 = 1) 與水 (折射率 = 1.3) 的折射率不匹配。由于常規(guī)物鏡通常只用于被空氣包圍的樣品,而在水溶液中可能發(fā)生球面像差,潛在的關注結構或重要結構容易被誤讀。
探索 LAS X 軟件在生命科學中的應用
LAS X 是所有徠卡顯微鏡解決方案的軟件平臺。讓運行復雜熒光實驗變得簡單。LAS X (注意:新 LSR 用 LAS X 的網頁鏈接) 將指導您逐步完成整個分析工作流程。
● 實時數(shù)據(jù)模式:設計實驗模式,控制實驗環(huán)境
● 景深擴展 (ED(O)F)
● 將反卷積的 Z 軸堆疊與 XY 組合在一起,創(chuàng)建大概覽圖像
Solea senegalensis larvae nervous system, max projection of a tile scan of 6 fields x 33 planes. Parallax correction and tiling performed in LAS X after deconvolution with Huygens professional. Courtesy of Dr. Marco A. Campinho, CCMAR - Centre for Marine Sciences, Universidade do Algarve, Portugal.