電子顯微鏡與光學(xué)顯微鏡有何區(qū)別呢?
電子顯微鏡是以電子束為照明源,通過(guò)電子流對(duì)樣品的透射或反射及電磁透鏡的多級(jí)放大后在熒光屏上成像的大型儀器,電子顯微鏡由電子流代替可見(jiàn)光,由磁場(chǎng)代替透鏡,讓電子的運(yùn)動(dòng)代替,是利用了波長(zhǎng)比普通可見(jiàn)光短得多的X射線(xiàn)成像,具備很高的分辨率。而光學(xué)顯微鏡則是利用可見(jiàn)光照明,將微小物體形成放大影像的光學(xué)儀器。概括起來(lái),電子顯微鏡與光學(xué)顯微鏡主要有以下幾個(gè)方面的區(qū)別:
1.照明源不同。電鏡所用的照明源是電子槍發(fā)出的電子流,而光鏡的照明源是可見(jiàn)光(日光或燈光),由于電子流的波長(zhǎng)遠(yuǎn)短于光波波長(zhǎng),故電鏡的放大及分辨率顯著地高于光鏡。
2.透鏡不同。電鏡中起放大作用的物鏡是電磁透鏡(能在部位產(chǎn)生磁場(chǎng)的環(huán)形電磁線(xiàn)圈),而光鏡的物鏡則是玻璃磨制而成的光學(xué)透鏡。電鏡中的電磁透鏡共有三組,分別與光鏡中聚光鏡、物鏡和目鏡的功能相當(dāng)。
3.成像原理不同。在電鏡中,作用于被檢樣品的電子束經(jīng)電磁透鏡放大后打到熒光屏上成像或作用于感光膠片成像。其電子濃淡的差別產(chǎn)生的機(jī)理是,電子束作用于被檢樣品時(shí),入射電子與物質(zhì)的原子發(fā)生碰撞產(chǎn)生散射,由于樣品不同部位對(duì)電子有不同散射度,故樣品電子像以濃淡呈現(xiàn)。而光鏡中樣品的物像以亮度差呈現(xiàn),它是由被檢樣品的不同結(jié)構(gòu)吸收光線(xiàn)多少的不同所造成的。
4.所用標(biāo)本制備方式不同,電鏡觀(guān)察所用組織細(xì)胞標(biāo)本的制備程序較復(fù)雜,技術(shù)難度和費(fèi)用都較高,在取材、固定、脫水和包埋等環(huán)節(jié)上需要的試劑和操作,還需將包埋好的組織塊放人切片機(jī)切成50~100nm厚的超薄標(biāo)本片。而光鏡觀(guān)察的標(biāo)本則一般置于載玻片上,如普通組織切片標(biāo)本、細(xì)胞涂片標(biāo)本、組織壓片標(biāo)本和細(xì)胞滴片標(biāo)本等。
光學(xué)顯微鏡的分辨率與光波的波長(zhǎng)有關(guān)。對(duì)于接近和小于光波波長(zhǎng)的物體,光學(xué)顯微鏡就無(wú)能為力了。電子運(yùn)動(dòng)的波長(zhǎng)比光波波長(zhǎng)短的多,就可以看到更細(xì)小的物體。光學(xué)顯微鏡是由一組光學(xué)鏡頭組成的放大成像系統(tǒng),而電子顯微鏡由電子流代替可見(jiàn)光,由磁場(chǎng)代替透鏡,讓電子的運(yùn)動(dòng)代替光子,這樣就可以看到比光學(xué)系統(tǒng)能看到的更小的物體。
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