商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
T5核酸外切酶 | 1000U、10KU | A-PJ1113 |
產(chǎn)品介紹:
T5 核酸外切酶沿 5’-3’方向降解 DNA,它可降解雙鏈DNA、單鏈 DNA 和缺刻的質(zhì)粒 DNA。它既能從 5’-末端起始降解 DNA,也能從線性或環(huán)狀雙鏈 DNA 的切刻或缺口處起始降解 DNA,但不能降解超螺旋雙鏈 DNA?;谝陨咸匦?,T5 核酸外切酶可應(yīng)用于 Gibson 組裝。
儲(chǔ)存:-20℃可保存 3 年。
活性定義:1 單位指在 50 μl 反應(yīng)體系,37°C 條件下,30分鐘內(nèi)能從雙鏈 DNA 底物上催化產(chǎn)生 1 nmol 的酸可溶性脫氧核糖核苷酸所需要的酶量。
使用注意事項(xiàng):
(1)1×T5 Exo Buffer:50mM KAc,20mM Tris-Ac pH 7.9,10mM Mg(Ac)2,1mM DTT。該酶在 PCR Buffer 中也具有活性。
(2)該酶的最佳反應(yīng)溫度為 37°C,在 50°C 也具有一定活性,因此可用于 Gibson 組裝。
使用方法:
1.建立如下反應(yīng)體系
模板 DNA 1 μg
10×T5 Exo Buffer 5 μl
T5 Exonuclease (10 U/μl) 1 μl
ddH2O upto 50 μl
2. 37°C,30min。
3. 加入 EDTA 至總濃度為 11mM,終止反應(yīng)。
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