商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
Exonuclease III | 5000U | A-PJ1126 |
產(chǎn)品介紹:
描述: 核酸外切酶 III 來(lái)源于 E.coli,具有 3′-5′外切酶活性,它作用于雙鏈 DNA,從 3′ OH 末端方向逐步切去單核苷酸;每次酶與底物結(jié)合催化,只有幾個(gè)核苷酸被除掉,從而在 DNA 分子群內(nèi)產(chǎn)生漸進(jìn)缺失。該酶的最佳底物為平末端、5′突出末端雙鏈 DNA 分子,但也可作用于雙鏈 DNA 的缺刻處,從 3′降解 DNA 分子,釋放 5′單核苷酸。對(duì)于 3′突出末端,尤其是多于 4nt 的幾乎不切割, 亦不能切割硫代磷酰脂鍵。核酸外切酶 III 的活性部分依賴螺旋結(jié)構(gòu),并根據(jù)序列的不同 而有差異(C>A=T>G)。另外,核酸外切酶 III 還具有脫嘌呤/嘧啶-核酸內(nèi)切酶活性、RnaseH 活性和 3′磷酸酶活性。
活性定義:50 μl 反應(yīng)體系中,37℃ 條件下,30 分鐘
催化 E.coli DNA 產(chǎn)生 1 nmol 酸可溶性產(chǎn)物所需要的量定義為一個(gè)活性單位。
應(yīng)用: 非定向巢式缺失定點(diǎn)突變鏈特異性探針的制備
制備用于雙脫氧測(cè)序的單鏈底模板
熱失活:70°C,20min。
1X Exonuclease III Buffer: 10 mM Bis-Tris(pH 7.0),10
mM MgCl2,1 mM DTT。
酶儲(chǔ)存液:50 mM Tris-HCl (pH 8.0), 50 mM KCl, 1 mM
DTT, 25% Glycerol.
儲(chǔ)存:置于-20°C 可保存 2 年,避免反復(fù)凍融。
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