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貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
AS6321115 | 半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)測試盒 | 100管/48樣 |
AS6321115 | 半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)測試盒 | 50管/24樣 |
測定意義
半胱氨酰亞砜裂解酶(CSL)廣泛存在于百合科蔥屬(如大蒜和洋蔥),十字花科蕓薹屬
(如卷心菜,菜花,西蘭花),以及豆科中的合金歡屬中,并通常被稱為蒜氨酸酶(Alliinase)。香菇酸在γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶和半亞砜裂解酶的作用下轉(zhuǎn)化成香菇精,以及產(chǎn)生丙酮酸、乙醛、甲醛和NH3。CSL是內(nèi)源性甲醛生成的關(guān)鍵酶之一,測定CSL活性對于研究食品安全具有重要意義。
測定原理
CSL催化S-甲基-L-半胱亞砜反應(yīng)產(chǎn)生丙酮酸,與2,4-二硝基應(yīng),在堿性條件下顯棕紅色,在510nm下有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、研缽、離心機(jī)、酶標(biāo)儀、96孔板、恒溫水浴鍋、蒸餾水。
試劑組成和配制
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,4℃避光保存,臨用前加入2mL水溶解,用不完的試劑分裝后-20℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,-20℃避光保存,臨用前加入10mL水溶解,用不完的試劑分裝后-20℃保存;
試劑三:液體15mL×1瓶,4℃保存。
試劑四:液體6mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑五:液體30mL×1瓶,4℃保存。
樣本處理
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿,4℃浸提40min。12000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
測定操作
對照管 | 測定管 | |
樣品(μL) | 50 | 50 |
試劑一(μL) | 25 | |
蒸餾水(μL) | 25 | |
試劑二(μL) | 25 | 25 |
充分混勻,37℃反應(yīng)20min | ||
試劑三(μL) | 100 | 100 |
試劑四(μL) | 50 | 50 |
充分混勻,室溫反應(yīng)5min | ||
試劑五(μL) | 250 | 250 |
充分混勻,靜置5min,吸取200μL至96孔板,測定510nm處吸光值,記為A對照和A測定,△A=A測定-A對照。每個(gè)測定管設(shè)一個(gè)對照管。 |
計(jì)算公式
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.7313x + 0.0027,R2 = 0.9993;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度:μmol/mL;y為吸光度△A
按蛋白含量計(jì)算
C-S lyase活性(μmol/min/mg prot)=(△A -0.0027)÷ 0.7313×V樣÷(V樣×Cpr )÷T
=0.068×(△A-0.0027)÷ Cpr
2. 按照樣本質(zhì)量計(jì)算
C-S lyase活性(μmol/min/g 鮮重)=(△A -0.0027)÷ 0.7313×V樣÷(V樣÷V樣總×W )÷T
=0.068×(△A-0.0027)÷ W
V樣,加入樣本上清體積,0.05mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;T,反應(yīng)時(shí)間,20min。
注意事項(xiàng)
若測定結(jié)果中吸光值超過1,請將樣本稀釋后進(jìn)行測定,并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。香菇類樣本活性較大,可能需要稀釋80-100倍。
公司正在出售的產(chǎn)品:
HAase ELISA Kit | Archain1蛋白ELISA試劑盒 |
Anti-Neutrophil Elastase Antibody(ANEA)ELISA Kit | CD5分子ELISA試劑盒 |
cAMP和cAMP抑制cGMP | C-型凝集su域家族11成員AELISA試劑盒 |
Cornulin蛋白ELISA試劑盒 | Girdin蛋白ELISA試劑盒 |
大鼠牛小腸堿性磷suanmei(CIAP)ELISA Kit | 大鼠白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)試劑盒 ELISA |
腺苷甲硫氨suan脫羧mei1ELISA試劑盒 | 鴨γ干擾su(IFN-γ)ELISA試劑盒 |
人巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)試劑盒ELISA | D-氨基suan氧化mei激活因子ELISA試劑盒 |
豬單核細(xì)胞增多性李斯特菌suO((LLO)檢測試劑盒elisa | 白喉棒桿菌PCR試劑盒 |
呼吸道合胞病毒A 型(RSV-A)核suan檢測試劑盒 | 泰澤隱孢子蟲PCR檢測試劑盒 |
腸道病毒通用RT-PCR試劑盒,停 | 生殖支原體PCR試劑盒 |
皮諾卡菌PCR檢測試劑盒 | 呼吸道合胞病毒B型RT-PCR試劑盒 |
豬類圓線蟲PCR檢測試劑盒 | DPPⅣ 大鼠二肽基肽ⅣELISA檢測試劑盒 |
BMPR-1A 人骨成型蛋白受體1AELISA檢測試劑盒 | 呼吸道合胞病毒B 型(RSV-B)核suan檢測試劑盒 |
BMP-4 小鼠骨成型蛋白4ELISA檢測試劑盒 | 太米阿米病毒PCR檢測試劑盒 |
延伸蛋白A3(ELOA3)ELISA試劑盒 | Bid 人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白ELISA檢測試劑盒 |