本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
AS6321220 | 蔗糖合成酶(合成方向 SSⅡ)測試盒 | 100管/48樣 |
AS6321220 | 蔗糖合成酶(合成方向 SSⅡ)測試盒 | 50管/24樣 |
測定意義
蔗糖是源(葉片等)光合產(chǎn)物向“庫”器官運(yùn)輸?shù)闹饕螒B(tài)。蔗糖合成酶(Sucrose Synthase, EC 2.4.1.13)是雙向反應(yīng)酶,既可催化蔗糖合成又可催化蔗糖分解,是蔗糖代謝的關(guān)鍵酶之一。研究其合成方向SS-Ⅱ的活性對于植物蔗糖合成具有重要意義。
測定原理
SS-Ⅱ催化游離果糖與葡萄糖供體UDPG反應(yīng)生成蔗糖,蔗糖與間苯二反應(yīng)可呈現(xiàn)顏色變化,在480nm下有特征吸收峰,酶活力大小與顏色的深淺成正比。
需自備的儀器和用品
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、離心機(jī)、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰
試劑的組成和配制
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體2.5mL×1瓶,-20℃保存;
試劑二:1000μg/mL蔗糖溶液10mL×1瓶,4℃保存;
試劑三:液體2mL×1瓶,4℃保存
試劑四:液體25mL×1瓶,4℃保存;
試劑五:液體6mL×1瓶,4℃避光保存;
樣品測定的準(zhǔn)備:
按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
測定步驟
分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至480nm,蒸餾水調(diào)零。
樣本測定,(在EP管中依次加入下列試劑):
試劑名稱(μL) | 測定管 | 對照管 | 標(biāo)準(zhǔn)管 | 空白管 |
樣本 | 10 | 10 | ||
蒸餾水 | 45 | 45 | 55 | |
試劑二 | 10 | |||
試劑一 | 45 |
混勻,25℃準(zhǔn)確水浴10min
試劑三 | 15 | 15 | 15 | 15 |
沸水浴中煮沸10min左右(蓋緊,以防止水分散失),冷卻
試劑四 | 210 | 210 | 210 | 210 |
試劑五 | 60 | 60 | 60 | 60 |
混勻,沸水浴30min,冷卻后,取200μL 至微量石英比色皿或96孔板中,480nm下測定各管吸光值。標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只要做一管。每個(gè)測定管需要設(shè)一個(gè)對照管。
SS-Ⅱ活性計(jì)算
1、按照蛋白濃度計(jì)算
單位定義:每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1μg 蔗糖定義為一個(gè)酶活力單位。
SS-Ⅱ活性(μg /min/mg prot)= C標(biāo)準(zhǔn)管×V1×(A測定管-A對照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷(V1×Cpr)÷T=100×(A測定管-A對照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷Cpr
2、按照樣本鮮重計(jì)算
單位定義:每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1μg 蔗糖定義為一個(gè)酶活力單位。
SS-Ⅱ活性(μg /min/g鮮重) = C標(biāo)準(zhǔn)管×V1×(A測定管-A對照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=100×(A測定管-A對照管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W
C標(biāo)準(zhǔn)管:標(biāo)準(zhǔn)管濃度,1000μg/mL;V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.01mL; V2:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本鮮重,g;T :反應(yīng)時(shí)間:10min。
公司正在出售的產(chǎn)品:
P-CK ELISA Kit | Clavesin1蛋白ELISA試劑盒 |
APC ELISA Kit | Enamelin蛋白ELISA試劑盒 |
Discs大同源物3ELISA試劑盒 | G蛋白偶聯(lián)受體家族C5組成員AELISA試劑盒 |
GasderminB蛋白ELISA試劑盒 | Metaxin3蛋白ELISA試劑盒 |
大鼠細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)試劑盒 ELISA | 大鼠胱天蛋白mei3(Casp-3)ELISA Kit |
雄烯酮ELISA試劑盒 | 人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白H(hnRNP H)ELISA檢測試劑盒 |
人乳腺癌易感蛋白1(BRCA-1)elisa試劑盒 | Igγ3鏈C區(qū)ELISA試劑盒 |
人總蛋白C(TPC)試劑盒ELISA | 肺炎衣原體PCR試劑盒 |
極細(xì)密螺旋體PCR試劑盒 | 嗜吞噬細(xì)胞無漿體PCR檢測試劑盒 |
星狀病毒RT-PCR試劑盒 | 肉毒梭狀芽孢桿菌A型外毒su基因PCR試劑盒 |
豬環(huán)曲病毒PCR檢測試劑盒 | 吉氏巴貝斯蟲PCR試劑盒 |
高首鱘虹彩病毒PCR檢測試劑盒 | AmAC-1 大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1ELISA檢測試劑盒 |
CⅠCP 大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽ELISA檢測試劑盒 | 吉氏巴貝斯蟲PCR試劑盒 |
C4a 小鼠過敏毒su/補(bǔ)體片斷4aELISA檢測試劑盒 | 飾紋汀蛙虹彩病毒PCR試劑盒 |
血清淀粉樣蛋白A4(SAA4)ELISA試劑盒 | C3 兔補(bǔ)體蛋白3ELISA檢測試劑盒 |