LUNA-FL熒光全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀

“它的表現(xiàn)超過了我們?cè)囉眠^的所有其它競爭者的儀器?！?br>Michael DaCosta, The Jackson Laboratory

的全自動(dòng)對(duì)焦和計(jì)數(shù)算法
Countess全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀包含的全自動(dòng)對(duì)焦和計(jì)數(shù)算法，從而快速精確地找到并計(jì)數(shù)細(xì)胞（圖1）。Countess計(jì)數(shù)儀適合于多種細(xì)胞類型和細(xì)胞系，并且我們已經(jīng)在很多常用細(xì)胞系上對(duì)其使用進(jìn)行了驗(yàn)證。插入玻片后，Countess計(jì)數(shù)儀會(huì)全自動(dòng)對(duì)焦于細(xì)胞平面，從而減少由于手動(dòng)對(duì)焦造成的用戶間計(jì)數(shù)差異。細(xì)胞大小在~7 µm至60 µm之間并且其懸浮密度為1 x 104 到1 x 107 細(xì)胞/mL時(shí)，計(jì)數(shù)表現(xiàn)。
1. 使用細(xì)胞計(jì)數(shù)板和使用Countess II計(jì)數(shù)儀的用戶間計(jì)數(shù)差異比較。相同的A549, COS-7, HeLa和U2OS細(xì)胞樣本分別由三名不同操作者使用Countess II細(xì)胞計(jì)數(shù)儀和手動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)板和顯微鏡計(jì)數(shù)。結(jié)果顯示使用細(xì)胞計(jì)數(shù)板的用戶間計(jì)數(shù)差異顯著大于使用Countess II計(jì)數(shù)儀。
輕松對(duì)細(xì)胞設(shè)門并瀏覽柱狀圖
可根據(jù)細(xì)胞大小、亮度和圓度輕松對(duì)細(xì)胞設(shè)門，從而根據(jù)具體的應(yīng)用精準(zhǔn)微調(diào)涵蓋/排除的細(xì)胞。 可通過選擇圖形圖標(biāo)瀏覽柱狀圖，在使用設(shè)門功能的同時(shí)觀察實(shí)時(shí)變化。 細(xì)胞平均大小也會(huì)顯示在柱狀圖上。
2. 柱狀圖實(shí)時(shí)更新以反映門限變化。 可針對(duì)活/死細(xì)胞單獨(dú)選擇多個(gè)門限選項(xiàng)，從而輕松地涵蓋/排除細(xì)胞碎片或特定細(xì)胞群。
稀釋計(jì)算器
通過內(nèi)置的稀釋計(jì)算器，輕松確定您的實(shí)驗(yàn)所需的細(xì)胞樣品及緩沖液的量。 計(jì)算時(shí)自動(dòng)使用細(xì)胞數(shù)結(jié)果；您可直接輸入所需的濃度和體積。
3. 稀釋計(jì)算器可快速確定所需的細(xì)胞樣品和緩沖液的量。

通過定制方案簡化您的工作流程
定制方案可保存，并在成像和結(jié)果界面輕松訪問（圖 4）。 細(xì)胞大小、亮度和圓度及熒光閾值等設(shè)置可自定義設(shè)置并保存，方便輕松檢索。
輕松訪問自定義實(shí)驗(yàn)方案。

包含細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果的可打印報(bào)告
通過 Countess II FL 全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的 USB 端口，您可以保存自己的細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果和圖像，然后傳輸?shù)侥挠?jì)算機(jī)上。 圖像文件可另存為 TIF、PNG 或 JPG 文件，而結(jié)果可另存為 CSV 文件。 此外，您還可保存包含結(jié)果、圖像及所用設(shè)置的可打印 PDF 報(bào)告。

節(jié)省時(shí)間
使用細(xì)胞計(jì)數(shù)板手動(dòng)計(jì)數(shù)（可長達(dá)5分鐘）比使用Countess II全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)（僅需10s）所花費(fèi)的額外時(shí)間作為額外的成本經(jīng)常被忽視。如果使用帶有可重復(fù)使用玻片的全自動(dòng)計(jì)數(shù)儀，每個(gè)人每天計(jì)數(shù)5塊玻片（每塊玻片2個(gè)樣本）則每月可節(jié)省大約10個(gè)小時(shí)。如果使用一次性玻片，則每月可節(jié)省的時(shí)間達(dá)到大約15小時(shí)。這些額外節(jié)省的時(shí)間可以用于實(shí)驗(yàn)室的其它活動(dòng)，這使用全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀顯著優(yōu)于手動(dòng)計(jì)數(shù)。

time savings with Countess Automated Cell Counter   
圖2. 使用全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀比使用細(xì)胞計(jì)數(shù)板每月節(jié)省的估計(jì)時(shí)間。
可比擬流式細(xì)胞儀的精確度
流式細(xì)胞儀和細(xì)胞計(jì)數(shù)板加顯微鏡的手動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)是熒光蛋白表達(dá)分析的金標(biāo)準(zhǔn)，但兩者均要求對(duì)使用者進(jìn)行高級(jí)訓(xùn)練和相對(duì)較貴的儀器。Countess II FL全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀有兩種可選、可換的熒光通道。計(jì)數(shù)儀所采集的顏色由插入的光立方?jīng)Q定，可選的光立方超過20種。

Countess II FL全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)可達(dá)到相當(dāng)?shù)木_度，但出結(jié)果的時(shí)間更快，成本更低，并且降低了用戶間計(jì)數(shù)差異。

圖3. 和流式細(xì)胞儀對(duì)PBMC計(jì)數(shù)的比較。Countess II FL計(jì)數(shù)儀安裝了EVOS™ GFP和Texas Red™光立方。PBMC細(xì)胞使用5μg/mL 和3 μg/mL的吖啶橙和乙錠進(jìn)行染色，以便分別找出所有細(xì)胞和死細(xì)胞。相同的樣本使用Attune NxT流式細(xì)胞儀進(jìn)行了分析，確認(rèn)了Countess II FL計(jì)數(shù)儀的結(jié)果。

全光譜熒光檢測——不于GFP和RFP
Countess II FL計(jì)數(shù)儀有兩個(gè)熒光通道。不同顏色熒光的采集取決于所安裝的光立方。Countess II FL計(jì)數(shù)儀有超過2種光立方可選，因此檢測范圍不于表達(dá)GFP和RFP的細(xì)胞。想測定使用RFP表達(dá)載體轉(zhuǎn)染并帶有藍(lán)色細(xì)胞核染色的細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率？沒問題。只需安裝RFP和DAPI光立方，就可以對(duì)總細(xì)胞和RFP表達(dá)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)并精確測定轉(zhuǎn)染效率。

使用Texas Red光立方可以用于分析mCherry表達(dá)細(xì)胞，mCherry是一種很受歡迎并常用的熒光蛋白。要獲得這些細(xì)胞的活力信息，僅需從多種顏色中選擇一種滿足應(yīng)用要求的活細(xì)胞/死細(xì)胞固定染料。這一靈活的光譜選擇使用Countess II FL計(jì)數(shù)儀的EVOS可互換光立方即可實(shí)現(xiàn)。