Chelex 100螯合樹脂是含有成對(duì)的二乙酸亞胺離子和聚苯乙烯二乙烯基苯載體結(jié)合的螯合樹脂,可以高選擇性的結(jié)合多價(jià)陽(yáng)離子。在鹽酸溶液中與氯離子結(jié)合。過渡族金屬元素在濃鹽酸中以離子形式和氯離子絡(luò)合形成絡(luò)陰離子,被Chelex 100螯合樹脂吸附。根據(jù)這些絡(luò)陰離子與交換樹脂親和力的差異,選擇適宜的酸和酸度,可依次將金屬元素分離。
Chelex 100螯合樹脂有不同的粒徑,常規(guī)的有20-50目,50-100目,100-200目和200-400目。目數(shù)越大,粒徑越小,產(chǎn)品分離純化分辨率越高,同時(shí)柱壓就會(huì)同步升高。同時(shí)該系列產(chǎn)品還有預(yù)裝小柱,50個(gè)一盒,方便研發(fā)人員篩選小試使用。
離子交換樹脂法是根據(jù)不同組分離子對(duì)固定離子基團(tuán)的親和力的差別而達(dá)到分離的目的,因而不同的酸介質(zhì)、不同的酸濃度都會(huì)影響離子的洗脫順序,而且樹脂床高度的不同也會(huì)影響樹脂柱有效塔板數(shù),影響離子在樹脂中的保留時(shí)間,繼而對(duì)離子分離效率產(chǎn)生影響。此外,離子交換樹脂不同的淋洗酸體積會(huì)明顯影響干擾離子的去除率和目標(biāo)離子的洗脫率,而且不同的洗脫速度也會(huì)明顯影響洗脫率。當(dāng)樹脂流動(dòng)相采用較低的流速時(shí),一般峰高較高,分離度也較大,但流速低,洗脫時(shí)間延長(zhǎng),又會(huì)降低單位樹脂的生產(chǎn)能力,而過快的流速則會(huì)將陽(yáng)離子交換樹脂表面的有機(jī)基團(tuán)沖刷移動(dòng),因此找到合適的分離條件是離子交換樹脂分離法的關(guān)鍵。
使用方法:
1,計(jì)算目標(biāo)樣品合適的樹脂裝填量,一般剛開始使用5g樹脂純化100ml樣品,然后根據(jù)實(shí)際試驗(yàn)結(jié)果調(diào)整樹脂使用量。
2,置換離子交換樹脂到合適的對(duì)抗離子形式。必要時(shí)可以使用氫氧化鉀,醋酸等溶劑變換對(duì)抗離子的形態(tài)。
3,配置合適酸堿度的緩沖液淋洗劑,如果不確定使用哪種淋洗液,可以使用滅菌的蒸餾水開始淋洗。
4,將溶脹好的離子交換樹脂裝入層析柱中,保證柱床緊實(shí)平整無氣泡。
5,將目標(biāo)樣品加入到樹脂柱床的上面,不要破壞樹脂柱床頂部的平整度。
6,以合適的流速洗脫樣品。
7,收集洗脫液并濃縮,得到目標(biāo)樣品。
Chelex 100螯合樹脂顆粒線性分布好,溶劑殘留低,可高壓滅菌,是化學(xué)分離純化堿土金屬,元素同位素等小分子化合物的理想介質(zhì)。