瓊脂糖的特點(diǎn):
•漿液—交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖,在水溶液中呈漿狀
•高容量—可結(jié)合至少 40 mg 純化重組 GST 蛋白/毫升樹脂
•高得率和高純度—可持續(xù)純化至少 10 mg GST 標(biāo)簽蛋白/毫升樹脂,且純度大于 90%
•節(jié)約成本—樹脂價(jià)格實(shí)惠,可重復(fù)使用至少五次且結(jié)合容量和純化性能不會(huì)降低
• 通用型—可從細(xì)菌裂解物中有效純化 GST 融合蛋白或與預(yù)純化 GST 標(biāo)簽蛋白配合使用以降低蛋白相互作用
•兼容性好—經(jīng)驗(yàn)證可有效與 Thermo Scientific 細(xì)胞裂解試劑配合使用,以從細(xì)菌和哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)物中進(jìn)行提取和純化
高質(zhì)量支持物由組成,通過其中心巰基基團(tuán)的 12 原子間隔臂固定至交聯(lián) 6% 微珠狀瓊脂糖上。使用 (GSH) 瓊脂糖微珠純化 GST 融合蛋白已有完備的文獻(xiàn)支持,并可適用于多種規(guī)模、柱規(guī)格和特殊應(yīng)用。無論目的是純化來自過表達(dá)大腸桿菌裂解物的大量重組蛋白還是研究與 GST 標(biāo)簽誘餌蛋白有關(guān)的蛋白相互作用,Pierce 瓊脂糖均適用于該工作。
Pierce 瓊脂糖可從細(xì)菌裂解物(如使用 Thermo Scientific B-PER 細(xì)菌蛋白提取試劑獲得的裂解物)中有效純化高水平的過表達(dá) GST 標(biāo)簽融合蛋白。
Pierce 瓊脂糖可在多種規(guī)模下良好執(zhí)行批量結(jié)合和離心柱程序。性能等于或超過其他供應(yīng)商的常用 GSH 樹脂。
Pierce 瓊脂糖是一種高質(zhì)量、穩(wěn)定且具有彈性的親和支持物。各種試驗(yàn)證實(shí)在至少五次重復(fù)使用后,其性能不會(huì)降低。這些數(shù)據(jù)表明,在正常使用期間,樹脂對(duì)結(jié)構(gòu)降解或配體浸出具有高度耐受性。
重組蛋白的表達(dá)和純化對(duì)于蛋白質(zhì)調(diào)控、結(jié)構(gòu)和功能研究至關(guān)重要。大多數(shù)重組蛋白均表達(dá)為含有短親和性標(biāo)簽或小蛋白(如 S 轉(zhuǎn)移酶 (GST))的融合體。該蛋白可在近中性、非變性條件下(如 Tris 緩沖液)與還原型 (GSH) 特異性結(jié)合。結(jié)合蛋白可使用含自由、還原性 GSH(氧化(GSSH)不適于該目的) 的緩沖液利用競(jìng)爭(zhēng)性替換輕易解離(洗脫)。當(dāng)目標(biāo)蛋白表達(dá)為含有 GST 的融合體且固定在固相支持物上時(shí),這種蛋白底物系統(tǒng)可實(shí)現(xiàn)重組蛋白的親和純化以及多種其他與這些蛋白相關(guān)的實(shí)驗(yàn)。
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