CY5-Streptavidin,花青染料Cy5鏈酶親合素
鏈霉親和素(SA)簡述:
鏈霉親和素(SA)是Streptomyces avidinii菌的分泌物,其分子量及結(jié)合生物素的能力與雞蛋清中的親和素相似,等電點(diǎn)6.0,非特異性結(jié)合遠(yuǎn)比親和素低。
鏈霉親和素(SA)的來源:
SA 是Streptomyces avicllrdi菌培養(yǎng)過程中的分泌產(chǎn)物,主要通過2一亞氨基生物索親和層析法提純,1L培養(yǎng)液中含蛋白10~60mg。鏈霉親和素是四聚體蛋白,大小為66KDa。一分子鏈霉親和素可以高度特異性地與四分子生物素結(jié)合,兩者之間的親和力極為強(qiáng)烈。
鏈霉親和素(SA)的應(yīng)用:
enzyme immunoassays, 酶免疫測定
immunohistochemistry, 免疫組織化學(xué)
flow cytometry, 流式細(xì)胞儀
Western blot, 原位雜交
immunoblotting procedures免疫印跡程序
Western blot免疫印跡
鏈霉親和素(SA)的熒光標(biāo)記物及激發(fā)波長:
熒光染料
顏色
Ex(nm)
Em(nm)
FITC
綠色
490
525
TRITC
黃色
547
572
Cy3
黃色
555
570
Cy5
紅色
646
620
Cy7
深紅色
750
773
CY5-Streptavidin,花青染料Cy5鏈酶親合素
相關(guān)*產(chǎn)品:
Streptavidin-FITC
Streptavidin-TRITC
Streptavidin-CY5
Streptavidin-CY3
Streptavidin-thiol
FITC-BSA
TRITC-BSA
BAS-CY5
BAS-CY3
BAS-Biotin
Concanavalin A-CY5
Concanavalin A-CY3
Concanavalin A-CY5.5
Concanavalin A-FITC
Concanavalin A-Biotin
Concanavalin A-SH
Concanavalin A-TRITC
熒光標(biāo)記的鏈霉親和素(SA)的介紹:
FITC-Streptavidin:
FITC是廣泛使用的熒光基團(tuán),但其的缺點(diǎn)是淬滅快,使用抗淬滅劑可以減輕。
花青染料(Cy2,Cy3,Cy5,Cy7-Streptavidin):
Cy2比FITC更穩(wěn)定,且在表面熒光顯微鏡下,Cy2的熒光FITC更強(qiáng)。Cy3和Cy5比大多數(shù)熒光基團(tuán)更亮,更穩(wěn)定,背景更弱。二者常在共聚焦顯微實(shí)驗(yàn)中作多標(biāo)記。但Cy5的缺點(diǎn)是不能用表面熒光顯微鏡觀察,因此通常用具有遠(yuǎn)紅外檢測器的共聚焦顯微鏡觀察。
TRITC-Streptavidin:
TRITC,RRX,TR:TRITC經(jīng)常和FITC一起用于雙標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中,也可以使用RRX或TR,但TR會(huì)產(chǎn)生較高的背景。在使用裝有氪氫燈的激光共聚焦掃描顯微鏡作三標(biāo)記實(shí)驗(yàn)時(shí),RRX尤其有用,可以和Cy2(或FITC)及Cy5一起使用,因?yàn)镽RX的發(fā)射波長在Cy2和Cy5中間,且和這兩者的重疊很少。