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細(xì)胞破壁方法的很多種,常規(guī)的有高壓勻漿法、超聲破碎法、酶溶法等,這些破壁的方法各有優(yōu)缺點(diǎn),下面簡(jiǎn)單介紹一下:
一、高壓勻漿法
設(shè)備是高壓勻漿器,它由高壓泵和勻漿間組成,美國(guó)Microfluidics公司和ATS公司均有產(chǎn)品出售。其破碎機(jī)理:細(xì)胞在一系列過(guò)程中經(jīng)歷了高速造成的剪刀,碰撞以及由高壓到常壓的變化從而造成細(xì)胞的破碎。
存在的問(wèn)題;較易造成堵塞的團(tuán)狀或絲狀真菌,較小的革蘭氏陽(yáng)性首以及有些亞細(xì)胞器,質(zhì)地堅(jiān)硬,易損傷勻漿閥,也不適合用該法處理。
二、超聲破碎
頻高于15-20KHz的超聲波在高強(qiáng)度聲能輸入下可以進(jìn)行細(xì)胞破碎。其破碎機(jī)理:可能與空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪切力有關(guān)。超聲破碎的效率與聲頻、聲能、處理時(shí)間、細(xì)胞濃度及首種類(lèi)型等因素有關(guān)。
存在問(wèn)題;超聲波破碎在實(shí)驗(yàn)室規(guī)模應(yīng)用較普遍,處理少量樣品時(shí)操作簡(jiǎn)便,液量損失少,但是超聲波產(chǎn)生的化學(xué)自由基團(tuán)能使某些敏感性活性物質(zhì)變性失活。而且大容量裝置聲能傳遞,散熱均有困難。
三、酶溶法
就是用生物酶將細(xì)胞壁和細(xì)胞臘消化溶解的方法。常用的溶酶有溶菌酶β-1.3-葡聚糖酶、蛋白酶等。
存在的問(wèn)題;易造成產(chǎn)物抑制作用,這可能是導(dǎo)致胞內(nèi)物質(zhì)釋放率低的一個(gè)重要因素。而且溶酶價(jià)格高,限制了大規(guī)模利用。若回收溶酶,則又增加百分離純化溶酶的操作。另外酶港法通用性差,不同菌種需選擇不同的酶。
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如果采用IKN細(xì)胞破壁均質(zhì)機(jī)來(lái)破碎,植物細(xì)胞的破壁率將大大提高。采用IKN細(xì)胞破壁均質(zhì)機(jī)可將海藻植物細(xì)胞破壁的破壁率提高到95%以上。而且生產(chǎn)效率非常高,操作簡(jiǎn)單。
IKN細(xì)胞破壁均質(zhì)機(jī)的結(jié)構(gòu):細(xì)胞破壁均質(zhì)機(jī)是由膠體磨+均質(zhì)機(jī)的組合而成的高科技產(chǎn)品??梢韵葘⒅参镂锪舷妊心?,研磨細(xì)化后再通過(guò)分散頭,進(jìn)行分散,這樣可以避免細(xì)胞細(xì)化后抱團(tuán)現(xiàn)象,從而提高細(xì)胞的破壁率。
*級(jí)由具有精細(xì)度遞升的三級(jí)鋸齒突起和凹槽。定子可以無(wú)限制的被調(diào)整到所需要的與轉(zhuǎn)子之間的距離。在增強(qiáng)的流體湍流下,凹槽在每級(jí)都可以改變方向。(齒列的深度:從開(kāi)始的2.7mm,到末端的0.7mm)
第二級(jí)由轉(zhuǎn)定子組成。分散頭的設(shè)計(jì)也很好地滿(mǎn)足不同粘度的物質(zhì)以及顆粒粒徑的需要。
細(xì)胞破壁均質(zhì)機(jī)的特點(diǎn)
① 線(xiàn)速度很高,剪切間隙非常小,當(dāng)物料經(jīng)過(guò)的時(shí)候,形成的摩擦力就比較劇烈,結(jié)果就是通常所說(shuō)的濕磨
② 定轉(zhuǎn)子被制成圓椎形,具有精細(xì)度遞升的三級(jí)鋸齒突起和凹槽。
③ 定子可以無(wú)限制的被調(diào)整到所需要的與轉(zhuǎn)子之間的距離
④ 在增強(qiáng)的流體湍流下,凹槽在每級(jí)都可以改變方向。
⑤ 高質(zhì)量的表面拋光和結(jié)構(gòu)材料,可以滿(mǎn)足不同行業(yè)的多種要求。
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