人CP ELISA Kit試劑盒組成
人CP ELISA Kit標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中待測物質(zhì)水平。用純化的待測物質(zhì)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入待測物質(zhì),再與HRP標(biāo)記的待測物質(zhì)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測物質(zhì)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物質(zhì)濃度。
操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
操作程序總結(jié):
計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,*使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6 個(gè)月
本試劑盒僅供科學(xué)研究使用。
尊敬的客戶:
本公司是專業(yè)的Elisa試劑盒的供應(yīng)商,提供專業(yè)的代測服務(wù),并免費(fèi)送貨上門。
您可通過本頁面和本公司客服銷售,或致電頁面上顯示的與我司銷售人員,我們將及時(shí)回復(fù)您!
獨(dú)伊生物科技(上海)有限公司現(xiàn)貨供應(yīng)以上Elisa試劑盒*產(chǎn)品:
大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βDglucosidase)ELISA試劑盒 Rat 1,3- βglucosidase D aureus (1,3- βDglucosidase) ELISA kit.
大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒 The rats of 15 lipoxygenase (15-LO/LOX) ELISA kit.
大鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒 Rat 17 hydroxycorticosteroid (17-OHCS) ELISA kit.
大鼠17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒 The rats of 17 hydroxyprogesterone (17-OHP) ELISA kit.
大鼠17-酮類固醇(17-KS)ELISA試劑盒 Rat 17- Ketosteroid (17-KS) ELISA kit.
大鼠25羥維生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISA試劑盒 The rats of 25 hydroxyvitamin D3 (25 (OH) D3/25HVD3) ELISA kit.
大鼠26S蛋白酶體(26SPSM)ELISA試劑盒 Rat 26S proteasome (26SPSM) ELISA kit.
大鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒 Rat 5 nucleotidase (5-NT) ELISA kit.
大鼠5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒 5 rats of serotonin (5-HT) ELISA kit.
大鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒 Rat 6 keto prostaglandin (6-K-PG) ELISA kit.
大鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒 Rat 6 keto prostaglandin F1a (6-keto-PGF1a) ELISA kit.
大鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒 Rat 8 hydroxydeoxyguanosine (8-OHdG) ELISA kit.
大鼠8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒 8 rats 8-iso-prostaglandin (8-iso-PG) ELISA kit.
大鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒 Rat collagen type I (Col I) ELISA Kit
大鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA試劑盒 Rat collagen type N N-terminal peptide (NTX) ELISA kit.
大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒 Rat procollagen C N-terminal peptide (C CP) ELISA kit.
大鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒 Rat procollagen I carboxy terminal peptide (P CP) ELISA kit.
大鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒 Rat collagen type II (Col II) ELISA Kit
大鼠Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA試劑盒 Rat collagen type III (Col III) ELISA Kit
大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)ELISA試劑盒 Rat procollagen amino terminal peptide (P NT) ELISA kit.
大鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 Rat procollagen peptide (P NP) ELISA kit.
大鼠Ⅳ型膠原(ColⅣ)ELISA試劑盒 Rat collagen type IV (Col IV) ELISA Kit
大鼠apelin12(AP12)ELISA試劑盒 Rat Apelin12 (AP12) ELISA kit.
大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒 Rat BH3 domain induced apoptosis protein (Bid) ELISA kit.