質(zhì)粒小量提取試劑盒常見問題與解析

來源：上海同科生物科技有限公司 2017年08月01日 10:40

質(zhì)粒小量提取試劑盒常見從1～4mL菌液可以抽提到5～30µg的質(zhì)粒，純度高，OD260/OD280比值一般為1.8-2.0之間，質(zhì)?？芍苯佑糜赑CR、酶切、轉(zhuǎn)化測序和體外轉(zhuǎn)錄等后續(xù)實驗。那么在實驗過程中常見問題有哪些，下面跟小編一起來看一下。

質(zhì)粒小量提取試劑盒質(zhì)粒得率低可能原因及解決辦法：

1、菌體未活化，生長效率低，菌量少。需要活化菌種。

2、屬于低拷貝質(zhì)粒，增加菌液的量。

3、SolutionB裂解不充分，室溫靜置5min。

4、zui后洗脫體積不夠，洗脫液不少于50µL。

質(zhì)粒小量提取試劑盒質(zhì)粒純度差可能原因：

1、SolutionA未加入RNaseA或加入RNaseA的SolutionA 未4℃保存。

2、加入SolutionB劇烈震蕩，使得基因組斷裂。

3、加入BufferN操作慢，形成微小沉淀，蛋白質(zhì)無法被充分漂洗干凈。

4、BufferW2未加入無水乙醇。

5、OD260/OD280比值一般在1.8-2.0之間，小于1.8可能有蛋白污染，大于2.0有部分降解或RNA污染。

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