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液相色譜系統(tǒng)的組成及工作原理
閱讀:2193 發(fā)布時(shí)間:2019-9-20 液相色譜儀的體系由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的活動(dòng)相被高壓泵打入體系,樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入活動(dòng)相,被活動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi),因?yàn)闃悠啡芤褐械母鹘M分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)過(guò)反復(fù)屢次的吸附-解吸的分配進(jìn)程,各組分在移動(dòng)速度上發(fā)生較大的不同,被別離成單個(gè)組分順次從柱內(nèi)流出,經(jīng)過(guò)檢測(cè)器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái)。
液相色譜(highperformanceliquidchromatography,HPLC)也叫高壓液相色譜(highpressureliquidchromatography)、高速液相色譜(highspeedliquidchromatography)、高別離度液相色譜(highresolutionliquidchromatography)等。是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上,于60年代后期引進(jìn)了氣相色譜理論而迅速開展起來(lái)的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻,小顆粒具有高柱效,但會(huì)引起高阻力,需用高壓輸送活動(dòng)相,故又稱高壓液相色譜。又因剖析速度快而稱為高速液相色譜。
液相色譜是目前應(yīng)用較多的色譜剖析辦法,液相色譜體系由活動(dòng)相儲(chǔ)液體瓶、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器和記錄器組成,其整體組成類似于氣相色譜,可是針對(duì)其活動(dòng)相為液體的特點(diǎn)作出許多調(diào)整。HPLC的輸液泵要求輸液量穩(wěn)定平穩(wěn);進(jìn)樣體系要求進(jìn)樣便利切換緊密;因?yàn)橐后w活動(dòng)相粘度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氣體,為了減低柱壓液相色譜的色譜柱一般比較粗,長(zhǎng)度也遠(yuǎn)小于氣相色譜柱。HPLC應(yīng)用十分廣泛,簡(jiǎn)直廣泛定量定性剖析的各個(gè)領(lǐng)域。
使用液相色譜儀時(shí),液體待檢測(cè)物被注入色譜柱,經(jīng)過(guò)壓力在固定相中移動(dòng),因?yàn)楸粶y(cè)物種不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,不同的物質(zhì)順序離開色譜柱,經(jīng)過(guò)檢測(cè)器得到不同的峰信號(hào),后經(jīng)過(guò)剖析比對(duì)這些信號(hào)來(lái)判斷待側(cè)物所含有的物質(zhì)。液相色譜作為一種重要的剖析辦法,廣泛的應(yīng)用于化學(xué)和生化剖析中。液相色譜從原理上與經(jīng)典的液相色譜沒(méi)有實(shí)質(zhì)的不同,它的特點(diǎn)是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測(cè)器和微粒固定相,適于剖析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機(jī)化合物。