發(fā)酵罐系統(tǒng)操作規(guī)范

一、滅菌操作
1. 關(guān)閉所有供水管路及空氣管路。開啟蒸汽管路閥門。同時稍開啟發(fā)酵罐夾套的排氣閥門，排放夾套剩水。
2. 開啟發(fā)酵罐攪拌電機(jī)，轉(zhuǎn)速至200rpm，使發(fā)酵液受熱均勻。當(dāng)溫度升到95℃以上時，即可停止攪拌。然后待溫度升至121℃（罐壓在0.1～0.12Mpa）時即可計時開始。
3. 當(dāng)計時開始后，發(fā)酵時間一般為20-30分鐘。在此時間內(nèi)應(yīng)保證溫度不低于120℃.同時可進(jìn)行空氣過濾器及空氣管道的滅菌。
4. 空氣過濾器及空氣管道的滅菌：稍開過濾器的排水閥門，及空氣管道的隔膜閥，保證空氣管道的蒸汽滅菌。但不能開的太大，以免蒸汽大量進(jìn)入罐內(nèi)，而稀釋培養(yǎng)基。
5. 出料、采樣閥的蒸汽閥門及出口閥稍開，保證該管路滅菌。在發(fā)酵罐的蓋上的接種口，同樣需要放氣，使其達(dá)到滅菌要求。
6. 當(dāng)保溫結(jié)束時，應(yīng)先把空氣管路中的隔膜閥關(guān)閉。把空氣過濾器排水閥關(guān)閉，以及關(guān)閉取樣閥出口閥門和接種口螺帽。然后再關(guān)閉各路蒸汽閥門。
7. 打開冷卻水閥門及排水閥門，同時打開空氣流量計和空氣放空閥門，把空氣過濾器吹干。此時必須注意罐壓的變化。不能讓罐壓低于0.02Mpa。及當(dāng)罐壓達(dá)到0.05Mpa時，立即將空氣管路打開，保證發(fā)酵罐的罐壓在0.05Mpa左右。
8. 當(dāng)溫度降到95℃時，即可打開攪拌。當(dāng)溫度低于50℃后，即可切入自動控溫狀態(tài)，使培養(yǎng)基達(dá)到接種溫度，滅菌過程即告結(jié)束。
二、發(fā)酵過程的操作
1. 接種：接種方法可采用火焰接種法或差壓接種法。
（1）火焰接種法：在接種口用酒精火圈消毒，然后打開接種口蓋，迅速將接種液倒入罐內(nèi)，在把蓋擰緊。
（2）差壓法：在滅菌前放入墊片，接種時把接種口蓋打開，先倒入一定量的酒精消毒。待片刻后把種液瓶的針頭插入接種口的墊片。利用罐內(nèi)壓力和種液瓶內(nèi)的壓力差，將種液引入罐內(nèi)，擰緊蓋子。
2. 罐壓
發(fā)酵過程中須手動控制罐壓，即用出口閥控制罐內(nèi)壓力。調(diào)節(jié)空氣流量的，須同時調(diào)節(jié)出口閥，應(yīng)保持罐內(nèi)壓力恒定大于0.03Mpa。
3. 溶解氧（DO）的測量和控制
（1）溶解氧的標(biāo)定：在接種前，在恒定的發(fā)酵溫度下，將轉(zhuǎn)速及空氣量開到zui大值時的溶解氧DO值作為100%。
（2）發(fā)酵過程的溶解氧DO測量和控制：DO的控制可采用調(diào)節(jié)空氣流量和調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速來達(dá)到。zui簡單是轉(zhuǎn)速和溶氧的關(guān)聯(lián)控制。其次則必須同時調(diào)節(jié)進(jìn)氣量（手動）控制。有時需要通入純氧（如在某些基因工程菌的高密度培養(yǎng)中）才能達(dá)到要求的DO值。
4. pH 的測量與控制
（1） pH值的校正：在滅菌前應(yīng)對PH電極進(jìn)行PH值的校正。
（2）在發(fā)酵過程中PH值的控制使用蠕動泵的加酸加堿來達(dá)到的，酸瓶或堿瓶須先在滅菌鍋中滅菌。

三、控制器的操作
1. 控制器的啟動：打開電源，先按一下薄膜鍵盤上的“S/E”鍵，再按一下“確認(rèn)”鍵，發(fā)酵控制程序啟動；這時，如果加熱器中水沒有加滿，程序會自動進(jìn)行進(jìn)水操作；待水加滿后，用戶可以按照上述的下位機(jī)控制器的操作方法進(jìn)行對各個執(zhí)行機(jī)構(gòu)進(jìn)行控制。
2. 控制器的操作：使用F1～F6按鍵將液晶屏中的界面切換到用戶需要控制的界面中，使用方向鍵將界面中的光標(biāo)移動到需要控制的變量上，如果是改變運(yùn)行模式，直接按確認(rèn)鍵即可，如果需要鍵盤輸入數(shù)字，在輸入數(shù)字后按確認(rèn)鍵即可。如：
（1）溫度控制：在手動方式中，對溫度進(jìn)行手動操作是比較簡單，只需要改變手動狀態(tài)的控制量即可。通過選擇快捷鍵（F1～F5）進(jìn)入到溫度控制界面，然后移動光標(biāo)使它指向到“手動方式”，按下“確認(rèn)”鍵，即進(jìn)入溫度控制的手動方式中。此時，“手動方式”后面會出現(xiàn)一個小手來指示當(dāng)前的選擇是手動方式。將光標(biāo)移動到手動設(shè)置區(qū)域, 通過上下移動光標(biāo)選擇到“控制量”。通過按數(shù)字鍵輸入所需要設(shè)定的控制量輸出值，如80，并按“確認(rèn)”鍵確認(rèn)；（注：控制量范圍為0～100，當(dāng)輸入控制量大于50時為加熱狀態(tài)，反之為冷卻狀態(tài)）。
（2）轉(zhuǎn)速的控制：使用光標(biāo)移動鍵，移動光標(biāo)到“設(shè)定值”處。在數(shù)字鍵盤上輸入 300, 此時的“設(shè)定值”后應(yīng)該出現(xiàn)“300”的數(shù)值；然后按下“確認(rèn)”鍵確定輸入。若輸入有錯誤，可以按“清除”鍵清除數(shù)據(jù)。
四、蒸汽發(fā)生器的操作
1. 打開進(jìn)水管開關(guān)，使蓄水箱水位至zui高，保持進(jìn)水狀態(tài)
2. 連接發(fā)生器電源，向鍋內(nèi)供水至正常水位（液位管的50-80％），不得超過zui高水位，且不得低于zui低水位，關(guān)閉蒸汽出汽閥門
3. 插上電源，打開電源開關(guān)工作指示燈亮，開始加熱鍋水
4. 將蒸汽管連接至發(fā)酵罐體夾層管路系統(tǒng)，打開相關(guān)閥門，保持管路通暢，同時關(guān)閉發(fā)酵罐體出氣閥。當(dāng)壓力升至工作壓力后（2kg/cm2）打開蒸汽出汽閥，即可供汽
5．使用完畢，先關(guān)閉電源，后關(guān)閉進(jìn)水管，待發(fā)生器適當(dāng)降溫后，排掉鍋體中污水。
【注 意 事 項】
1. 安全閥的調(diào)定壓力已由廠家調(diào)整好，不得隨意調(diào)整，若發(fā)現(xiàn)安全閥失靈，應(yīng)更換新的安全閥。嚴(yán)禁私自改 變壓力自動控制功能和參數(shù)。
2. 在正常運(yùn)行期間，至少每8小時排污一次，并及時用砂紙給水位探針除垢
3. 在使用過程中，嚴(yán)禁關(guān)閉安全閥門，嚴(yán)禁私自改裝或用堵頭堵死
4. 壓力表存水彎管應(yīng)定期拆下清洗

五、空氣壓縮機(jī)的操作
1. 插上空壓機(jī)電源，開啟空壓機(jī)，使機(jī)器在無負(fù)荷狀態(tài)下啟動運(yùn)轉(zhuǎn)15分鐘。
2. 啟動后若無異音，關(guān)閉空氣出口，并將空壓機(jī)出氣管與空氣凈化器相連，一并聯(lián)至發(fā)酵罐空氣進(jìn)氣管路。
3. 當(dāng)氣壓升至2kg/cm2打開供氣閥，開啟空氣開關(guān)，向已滅菌的發(fā)酵罐提供無菌空氣?？諝鈮毫_(dá)到設(shè)定壓力之后，壓力開關(guān)自動切斷電源，電機(jī)停止運(yùn)轉(zhuǎn)。
4. 空氣壓縮機(jī)的使用壓力不得高于額定工作壓力，若需調(diào)整，必須有專門業(yè)務(wù)員進(jìn)行，不得自行調(diào)整。