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細胞培養(yǎng)的zui后一道防線

2013-4-8  閱讀(340)

 

支原體號稱細胞培養(yǎng)中的大敵。它就像慢性毒藥,殺細胞于無形中。據(jù)統(tǒng)計,超過25%的細胞系中感染了支原體,而研究者大多并不知曉。常規(guī)檢測可以降低支原體意外污染的機會,但并不能*避免。
在細胞培養(yǎng)中,我們通常使用0.2微米的濾膜來去除污染物。然而,這道防線只能阻擋細菌,而無法阻擋支原體。因支原體更?。s為0.15-2 µm),而且形狀靈活,故總是能逃過我們傳統(tǒng)的濾膜。這時,我們有必要升級秘密武器,與支原體斗爭到底。
如何升級呢?選用孔徑更小的濾膜,這也許是個不錯的主意。目前市場上有多家公司提供0.1微米的濾膜,如賽默飛世爾。Thermo Scientific Nalgene 0.1微米濾器具有*的Nalgene Rapid-Flow™ 膜支持系統(tǒng),有四種容量可供選擇:150mL、250 mL、500 mL 以及1000 mL。Rapid-Flow™ 系統(tǒng)采用多排柱狀結(jié)構(gòu),使得膜系統(tǒng)相較于其他過濾生產(chǎn)商使用的輻射輻條設(shè)計更加均一穩(wěn)定。據(jù)稱,這種設(shè)計特點能使濾膜通過更大的流速和通量。是不是這樣呢?賽默飛世爾的研究人員將Nalgene 0.1微米濾器與市場上的類似產(chǎn)品進行了性能比較。
誰來參加這場比賽?除了Nalgene Rapid-Flow™ 1000mL 濾器、Rapid-Flow™ 500mL 濾器,還有兩個強勁的對手,它們分別是M品牌的1000mL 濾器、和C品牌的500mL 濾器。當然,這些都是0.1微米PES濾膜。測試的液體是經(jīng)典的細胞生長培養(yǎng)基:DMEM+10% FBS(胎牛血清)及RPMI 1640+10% BGS(成牛血清)。
比什么?流速和堵塞體積。研究人員記錄DMEM+10% FBS 和RPMI 1640+10% BGS 每濾出100mL 的時間點,直至濾器堵塞(即每秒濾出一滴液體或過濾100ml 液體超過2 分鐘)或者1L DMEM+10% FBS、RPMI 1640+10% BGS液體過濾完畢。


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