微生物實驗室

一、選址：

實驗室應(yīng)選擇在清潔安靜的場所，遠離生活區(qū)，鍋爐房與交通要道；實驗室應(yīng)選擇在光線充足，通風(fēng)良好的場所，要與生產(chǎn)加工車間有一定距離；實驗室應(yīng)選擇在方便扦樣與檢驗，距離車間較近的工作場所。
二、結(jié)構(gòu)和布局：
根據(jù)生產(chǎn)實際需要，一般工廠應(yīng)設(shè)置細菌與理化檢驗兼有的綜合實驗室，主要包括以下三大部分：細菌實驗室、理化實驗室、辦公室。
1. 辦公室
理化分析實驗室：（或者和細菌檢驗操作室合并）
①理化分析室（兼作感觀檢驗室）
②儀器室（兼放細菌室顯微鏡等少量儀器）
細菌實驗室：
①細菌檢驗操作室；
②無菌室；
③培養(yǎng)基制作室；
④洗滌消毒室；
一般布局要求如下：
1. 辦公室：辦公室是化驗人員進行原始記錄等各項工作的場所，是與非化驗室人員交往較多的場所，因此，應(yīng)設(shè)在整體綜合化驗室的最外層，只需有桌、椅等簡單設(shè)施即可。
2. 細菌檢驗操作室（常規(guī)操作）細菌檢驗操作室是細菌培養(yǎng)與檢驗主要操作室，主要設(shè)施是實驗臺。
對實驗臺的要求：
a.實驗臺面積一般不小于2.4×1.3m；
b.實驗臺位置應(yīng)在實驗室中心位置，要有充足光線；也可以做邊臺。
c.實驗臺兩側(cè)安裝小盆與水龍頭；
d.實驗臺中間設(shè)置試劑架，架上裝有日光燈與插；
e.實驗臺材料要以耐熱、耐酸堿為宜。
3. 無菌室：無菌室通過空氣的凈化和空間的消毒為微生物實驗提供一個相對無菌的工作環(huán)境，無菌室是處理樣品和接種培養(yǎng)的主要工作間，應(yīng)與細菌檢驗操作室緊密相連。為滿足無菌室無菌要求，無菌間應(yīng)滿足以下布局：
入口避開走廊，設(shè)在細菌檢驗操作室內(nèi)；
b.與操作室用兩道緩沖間隔開；
c.無菌室與緩沖間均裝有紫外燈，要求每3平米安裝30ｗ紫外燈一盞；
d.無菌室內(nèi)設(shè)有實驗臺（實驗臺與邊臺皆可），紫外燈距實驗臺面要小于1.5m；
e.無菌室與操作室之間設(shè)有雙層窗構(gòu)成小通道。
4. 培養(yǎng)基制作室：培養(yǎng)基室是制作、配制微生物培養(yǎng)所需培養(yǎng)基及檢驗用試劑的場所，其主要設(shè)備應(yīng)為邊臺與藥品柜。
a.邊臺上要放置電爐，以滿足熔化煮沸培養(yǎng)基時用；
b.邊臺材料要耐高熱、耐酸堿；
c.藥品柜分門別類存放一些一般藥品及試劑；
d.危險、易腐易燃有毒有害藥品單獨設(shè)保險柜存放；
e.邊臺上要放天平，以稱取藥品用。
5. 洗滌消毒室：洗滌消毒室用以消毒洗滌待用與已用之玻璃器皿，培養(yǎng)基及污物，其面積應(yīng)大于10m2 。
為滿足洗滌消毒的功能，洗滌消毒室應(yīng)設(shè)有：
a.1-2個洗滌池，洗滌池上下水網(wǎng)要暢通；
b.器皿柜或?qū)嶒炁_，以放置洗滌好器皿；
c.高壓滅菌鍋，其所用電源應(yīng)滿足用電負荷；
d.室內(nèi)安有通風(fēng)裝置（通風(fēng)柜）或換氣扇；
e.有條件的單位還可在該室內(nèi)，設(shè)供日常檢驗用水蒸餾水器裝置。
6. 理化分析室：（如果沒有條件，這個可以和微生物常規(guī)實驗室合并）理化分析室是物理化學(xué)分析的主要操作室。
a.實驗臺與細菌操作室要求相同
b.設(shè)置通風(fēng)柜以滿足加熱、消化、干燥、燒灼和化學(xué)處理等工作需要；
c.洗滌池。
7. 儀器室：如果沒有條件，這個可以和微生物常規(guī)實驗室合并，用以放置顯微鏡、電子天平及理化分析用小型儀器；
要求清潔干燥、防潮防蟲、避光；
b.儀器臺要穩(wěn)固、牢靠。
對于小的企業(yè)實驗室，如果沒有更多的房間進行區(qū)分，應(yīng)該可以通過規(guī)劃房間分區(qū)，以保證實驗室不同工作區(qū)（潔凈區(qū)和一般操作區(qū)）之間有一定區(qū)分,因此，最少應(yīng)保證4個房間或者4個分區(qū)。
1．洗刷消毒區(qū)域，這個區(qū)域要求相對獨立，以房間間隔，因為這個區(qū)域處理廢物，有一定的污染和濕度。
2．培養(yǎng)基配制區(qū)域，用于培養(yǎng)基的配制，經(jīng)常有水等，需要相對獨立一些。
一般操作區(qū)域，這個是主要操作區(qū)域，微生物的試驗結(jié)果的觀察，顯微鏡操作，一般的簡單理化操作，儀器設(shè)備等，都可以合并在這個房間或者區(qū)域進行。
無菌操作區(qū)域，無菌間，這個要求獨立。
微生物實驗室分區(qū)及基本要求
良好的自然通風(fēng)，必要時應(yīng)配備抽風(fēng)機。接種、分離及鑒定細菌等操作應(yīng)在生物安全柜中進行，對結(jié)核桿菌等傳染性的微生物學(xué)檢驗時必須在100 ％外臨床微生物學(xué)實驗室接觸多種有害微生物，為了防止交叉污染，保護工作人員健康，實驗室應(yīng)至少劃分成3個區(qū)。
一、清潔區(qū)
包括辦公室、休息室、培養(yǎng)基配制室與試劑儲藏室。此區(qū)域禁止帶人細菌檢驗標本。
二、操作區(qū)
（1）整潔：微生物操作區(qū)是各種病原菌相對集中的地方，為了減少粉塵流動，防止交叉污染，操作區(qū)應(yīng)與外界分開。實驗室工作人員進入操作區(qū)應(yīng)換鞋，送標本人員不進入操作區(qū)，操作區(qū)地面用專用拖把每天拖1 次，每周用消毒劑擦洗1 次。每天早上工作前，用紫外線照射30 min ，或每天工作后，用紫外線照射60 min ，對整個操作區(qū)進行消毒；下午工作結(jié)束后用消毒液消毒工作臺面，以保證工作環(huán)境的安全清潔。
（2）光線：細菌培養(yǎng)的細小菌落及血清試驗?zāi)w粒的觀察， 都需要有充足的光線。操作區(qū)除設(shè)置常規(guī)照明燈外，還必須安裝操作臺燈，以保證實驗結(jié)果的正確判斷。
（3） 通風(fēng)：由于各種病原菌集中，空氣污濁，實驗室要求保持排的生物安全柜中進行。
（4）溫度和濕度：由于無菌操作的要求，實驗過程中經(jīng)常使用酒精燈，因此，微生物學(xué)實驗室不能安裝吊扇。為了達到實驗所需的適宜溫度，尤其是滿足某些儀器對溫度濕度的要求，實驗室應(yīng)安裝空調(diào)。
（5）電源：要求提供穩(wěn)壓、恒頻的電源；根據(jù)儀器設(shè)備要求，必要時配備不間斷電源。
（6）水源：操作區(qū)內(nèi)須設(shè)置水源。用于標本處理（如細菌染色） 的水槽與工作人員洗手用的水槽不能混用。
（7）污染物處理：操作區(qū)須備有消毒缸，以處理沾有活菌的玻片等污染物品。檢驗剩余的標本及使用過的帶菌平板、試管均須集中地點安全放置，經(jīng)消毒滅菌處理后再洗滌或丟棄。
三、無菌區(qū)
（1）無菌室應(yīng)封閉，進出無菌室至少要經(jīng)兩道門，中間隔有緩沖間，無菌室與外間設(shè)置一個可開閉的窗口，用于傳遞器具。
（2）無菌室必須保持整潔。工作人員進入無菌室應(yīng)換專用鞋、專用衣。無菌室使用前須用紫外線消毒30 min ，操作結(jié)束后清潔臺面，再用紫外線消毒30 min 。定期用乳酸或甲醛熏蒸，消毒。
（3）無菌室僅用于培養(yǎng)基分裝等無菌操作，不能進行有菌標本的操作。操作人員操作時應(yīng)嚴格關(guān)門，并戴好專用的口罩、帽子。
（4）無菌室內(nèi)應(yīng)有空氣過濾裝置，并安裝空調(diào)。
食品微生物實驗室設(shè)備
一、無菌室和超凈工作臺
是實驗室的核心部分，主要為樣品提供保護，保證實驗結(jié)果的準確和人員的安全。
（一）無菌室
無菌室通過空氣的凈化和空間的消毒為微生物實驗提供一個相對無菌的工作環(huán)境。無菌室的主要組成設(shè)備的空氣自凈器，傳遞窗，紫外線燈等。嚴格的無菌室可能還裝備風(fēng)彬室等。
（二）超凈工作臺
超凈工作臺作為代替無菌室的一種設(shè)備，使用簡單方便，為實驗的開展提供一個相對無菌的操作臺。超凈工作中國臺灣隊根據(jù)風(fēng)向分為水平式和垂直式。
二、培養(yǎng)箱
主要用于實驗室微生物的培養(yǎng)，為微生物的生長提供一個適宜的環(huán)境。
（一）普通培養(yǎng)箱：一般控制的溫度范圍為：室溫＋５～６５度，又分為電熱恒溫培養(yǎng)箱和隔水式恒溫培養(yǎng)箱。
（二）生化培養(yǎng)箱：一般控制的溫度范圍為：５～５０度。
（三）恒溫恒濕箱：一般控制的溫度范圍為：５～５０度，控制的濕度范圍為：５０～９０％。可作為霉菌培養(yǎng)箱。
（四）厭氧培養(yǎng)箱：適用于厭氧微生物的培養(yǎng)。
三、電熱干燥箱：用于吸管，平皿類玻璃器皿的干熱、滅菌和烘烤。
四、高壓蒸汽滅菌器（又叫高壓滅菌鍋）：物品的滅菌。
五、天平：一般要求具備精度達到萬分之一的分析天平。
六、顯微鏡：觀察細菌形態(tài)和動力、微生物和微小物品結(jié)構(gòu)的儀器。
七、分光光度計：在ＱＳ中用于生產(chǎn)方便面，茶飲料，肉制品，乳制品，棉白糖的企業(yè)。
八、酸度計：在ＱＳ中用于生產(chǎn)果蔬罐頭，白沙糖，飲用水類的企業(yè)。
九、電導(dǎo)率儀和濁度儀:在ＱＳ中用于生產(chǎn)飲用水的企業(yè)。
十、折光儀:在ＱＳ中用于生產(chǎn)果蔬罐頭，飲料類的企業(yè)。
十一、恒溫水溫浴鍋:在ＱＳ中用于部分培養(yǎng)溫度需要水?。ㄈ绱竽c桿菌檢驗）生產(chǎn)方便面，速凍面米食品企業(yè)。
十二、定氮裝置:在ＱＳ中用于生產(chǎn)乳制品，含蛋白質(zhì)飲料的企業(yè)。
雜質(zhì)度過濾機:在ＱＳ中用于生產(chǎn)乳品企業(yè)。
均質(zhì)器：用于均質(zhì)樣品，有旋轉(zhuǎn)刀片式和拍擊式可以選擇。
冰箱
常規(guī)玻璃器皿
一、 吸管：用于吸取少量液體，常用的吸管為0.1刻度1mL及1.0刻度的10mL吸管。
二、培養(yǎng)皿：為硬質(zhì)玻璃雙碟，常用于分離培養(yǎng)，蓋與底大小應(yīng)合適，常用規(guī)格為90mm。
三、三角燒瓶與廣口瓶：多用于盛培養(yǎng)基及配制溶液，常用的規(guī)格有250mL、500mL、1000mL。
四、燒杯：供盛液或煮沸用，常用的規(guī)格為100mL、250mL、500mL、1000mL
五、量筒：用于液體測量，常用規(guī)格為100mL、250mL、1000mL
六、試管：用于細菌培養(yǎng)，有多種規(guī)格。
七、載玻片蓋玻片：細菌涂片觀察用。
八、試劑瓶：裝試劑用，常用棕色避光
九、其它，如試管架、毛刷、酒精燈、接種針、接種環(huán)等
實驗室配套常用設(shè)備
一、通風(fēng)柜
二、離心機
三、純水器
四、烘箱
五、低溫冰箱實驗室常用消耗品(凈化工作臺)
六、其他
（一）實驗室耗材（槍頭）、振蕩器、菌落計數(shù)器、電位 pH計、高速離心機、離心管、試管、巴氏吸管、槍頭盒、培養(yǎng)皿、細胞培養(yǎng)板、酶標版、過濾器、移液管、接種環(huán)、接種針、比色皿、培養(yǎng)板、PCR管、量筒燒杯。
（二）常用設(shè)備，如鐵架臺、升降臺、滴定臺、鑷子、攪拌子、各種刷子、藥勺、濾紙、三腳架、支架，等等。
五、化學(xué)試劑和培養(yǎng)基
化學(xué)試劑和培養(yǎng)基：參照所執(zhí)行標準后面的附錄購買所需試劑和培養(yǎng)基，目前所用多為合成干粉培養(yǎng)基，試劑也可以購買到標準配套試劑。
實驗室配套常用試劑
營養(yǎng)瓊脂，乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基，乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基，伊紅美藍瓊脂等。
微生物實驗室基本設(shè)備的質(zhì)控要求
(1）孵箱：根據(jù)需要設(shè)置溫度，可調(diào)溫度范圍應(yīng)由室溫至60℃。孵箱溫度允許的波動幅度為設(shè)置溫度±1℃，如一般細菌培養(yǎng)，孵箱溫度應(yīng)為35℃±1℃。應(yīng)每天記錄孵箱溫度，定期加水，每月清潔內(nèi)壁和架子。
（2）冰箱和低溫冰箱：普通冰箱允許溫度為4℃±2℃，每天記錄溫度，并定期清潔。盡量減少冰箱開啟次數(shù)，減少溫度的波動。低溫冰箱控制溫度－20℃±5℃，每天觀察溫度并記錄，每隔3個月除霜1次。一旦溫度失控，及時調(diào)整。
（3）水浴箱：根據(jù)需要設(shè)置溫度，允許的溫度波動幅度為0.5℃，每日檢查水位，記錄溫度。每月擦拭箱體內(nèi)部并換水。
（4）高壓滅菌器：控制溫度121℃，每次使用前觀察并調(diào)整水位，記錄使用時間、溫度或壓力。每周用嗜熱芽孢桿菌檢測滅菌效果，每月清理內(nèi)部及換水，并定期檢測密封圈的密封效果。
（5）二氧化碳培養(yǎng)設(shè)備：常用的有二氧化碳箱和蠟燭罐，要求二氧化碳濃度為5％～10％，箱內(nèi)或罐內(nèi)保持濕度，并用淋病奈瑟菌作培養(yǎng)效果監(jiān)測。
（6）厭氧培養(yǎng)設(shè)備：主要有厭氧箱、厭氧罐、厭氧袋?；旌蠚怏w組分要求二氧化碳10％、氫氣10％和氮氣80％。厭氧箱與厭氧罐內(nèi)部要每周清潔，定期更換催化劑。每次使用培養(yǎng)設(shè)備均應(yīng)用美藍指示劑或銅綠假單胞菌檢測厭氧效果。
（7）天平：保持刀刃光滑而鋒利、稱盤清潔，并定期校正。
（8）pH計：要求誤差不超過0.02，并定期校正。
（9）顯微鏡：的是光學(xué)顯微鏡，應(yīng)注意保護油鏡。每次使用后應(yīng)用擦鏡紙擦去油鏡頭上的鏡油。每天工作結(jié)束后，應(yīng)用含少量（或酒精）的擦鏡紙擦拭油鏡，再用潔凈擦鏡紙擦干。另外，微生物學(xué)實驗室還用到暗視野顯微鏡、熒光顯微鏡等，均應(yīng)按規(guī)程清潔和保養(yǎng)。
（10）玻璃器皿：微生物學(xué)實驗室所用試管、吸管、平皿等應(yīng)潔凈無菌，不殘留酸堿。
（11）接種器具：分為接種針和接種環(huán)兩種。應(yīng)選用傳熱散熱快、耐用和不生銹的材料，早先使用的白金絲由于價格昂貴，目前多用比較經(jīng)濟的鎳鉻絲代替。一般要求接種環(huán)長5～8cm、直徑2～4mm，定量接種環(huán)要定期校正其容量，接種針長5～8cm。
設(shè)備控制標準保養(yǎng)及監(jiān)測
高壓滅菌器溫度≥121℃每次用前換水；每月清潔1次。
孵育箱溫度35℃±1℃每天記錄溫度；每月清潔內(nèi)壁和隔板。
水浴箱溫度37 ℃±0.5℃每天記錄溫度；每月擦內(nèi)壁和換水。
冰箱溫度4℃±2℃每天記錄溫度；保持清潔并定期除霜。
低溫冰箱溫度－20℃±5℃每天記錄溫度；保持清潔并定期除霜。
二氧化碳培養(yǎng)箱:二氧化碳5％～10％,每天記錄溫度；定期換水；用淋病奈瑟菌監(jiān)測效果。
厭氧培養(yǎng)箱:二氧化碳10％、氫氣10％、氮氣80％,每次使用時用厭氧指示劑監(jiān)測效果。
微生物標本采集、運送與處理原則
標本的正確采集、運送與處理對于細菌的培養(yǎng)、鑒定，有著十分密切的關(guān)系。
一、標本采集
（1）送檢申請單必須惟一標識，并注樣品名稱、型號、年月、性狀、標本來源、采集時間、檢驗?zāi)康募疤砑游锸褂们闆r等，以便實驗室能針對該標本選用相應(yīng)培養(yǎng)基和適宜培養(yǎng)環(huán)境，有利于對檢驗結(jié)果的綜合評估。
（2）為避免漏檢，確保病原體的檢出，應(yīng)盡量在抗菌藥劑使用前采集標本。
（3）標本采集時應(yīng)嚴格執(zhí)行無菌操作，減少或避免機體正常菌群及其他雜菌污染。
（4）以棉拭子采集標本，如拭子，應(yīng)插入送檢。
（5）混有正常菌群的標本，如拭子，不可置肉湯培養(yǎng)基內(nèi)送檢。
（6）盛標本容器須經(jīng)滅菌處理，但不得使用消毒劑。
（7）實驗室應(yīng)制定各種送檢標本的采集、運送、保存等正確方法和注意事項，并應(yīng)向取樣者詳細介紹如何正確留取和送檢標本。
二、標本運送
標本采集后應(yīng)立即送至微生物學(xué)實驗室。標本采集后在室溫下超過2h未送達實驗室者可視為不合格標本。生產(chǎn)線邊檢驗可提高病原菌檢出率，送檢標本必須與檢驗申請單有相同的惟一標識。
三、標本驗收
實驗室只能接收和處理合格的檢驗標本，因此應(yīng)制定不合格標本拒收標準；對不合格標本應(yīng)注明原因，退回，并做記錄。
四、標本處理
（1）實驗室收到標本后，應(yīng)立即根據(jù)標類型及檢驗?zāi)康?，選擇合適的培養(yǎng)基接種。
（2）混有正常菌群的標本，應(yīng)作定量細菌培養(yǎng)。不能精確定量或常規(guī)定量操作較困難的標本，分離出致病菌及條件致病菌為優(yōu)勢菌時，應(yīng)作細菌鑒定及藥敏試驗，同時注明細菌量化指標。
（3）對已用抗菌藥物治療的標本，可在培養(yǎng)基中加入某些物質(zhì)以中和藥物對細菌的抑制作用
微生物檢驗標本的采集
樣品在使用抗生素前，將標本采集在無菌容器內(nèi)，立即送到檢驗科細菌室，特殊檢驗應(yīng)先與細菌室聯(lián)系，再按要求采集標本，并立即送檢。
（一）樣品的采集：
1.憑檢驗申請單到檢驗科領(lǐng)取血培養(yǎng)瓶。
2.采取樣品部位和血培養(yǎng)瓶口應(yīng)嚴格消毒。
3.通常一般至少作三次血培養(yǎng)，在抗菌藥已實施者，更應(yīng)增加培養(yǎng)次數(shù)，懷疑特定菌種一般應(yīng)一日作三次培養(yǎng)，必要時需追加次數(shù)。
4.應(yīng)在生產(chǎn)高峰時采集。
5.對疑為細菌性污染的產(chǎn)品，嚴格消毒后抽取2～3 ml作增菌培養(yǎng)。
6.每次采樣量5-10ml，培養(yǎng)基與樣品之比以10∶1為宜，以稀釋樣品中的菌物質(zhì)。
7.采樣過程應(yīng)嚴格無菌操作，避免污染。
培養(yǎng)基質(zhì)量控制
一、配制時的質(zhì)量控制
（1）容器：配制和分裝培養(yǎng)基的燒瓶、平皿或試管等器材應(yīng)為中性，無酸、堿抑制物殘留，平皿底部要平，以免瓊脂厚薄不一，影響藥敏試驗結(jié)果。
（2）成分來源：各種成分來源可靠，不含對目的菌生長有抑制的物質(zhì)。特殊要求的培養(yǎng)基，如葡萄糖氧化發(fā)酵試驗（O／F 試驗），除加入葡萄糖外，不能含有其他糖類，指示劑不能用乙醇溶液，避免O／F試驗的假陽性。培養(yǎng)基配制用水應(yīng)是蒸餾水。
（3）pH值調(diào)整：根據(jù)培養(yǎng)基的不同要求調(diào)整pH 值，控制在要求范圍的±0.2之內(nèi)。應(yīng)當(dāng)注意，培養(yǎng)基在高壓滅菌后其pH 值降低0.1～0.2，故矯正時應(yīng)比實際需要p H值高0.1～0.2。
（4）滅菌：根據(jù)培養(yǎng)基所含成分及配制數(shù)量的不同，選擇不同的滅菌方式，既要達到滅菌效果，又不破壞培養(yǎng)基成分。一般對穩(wěn)定的培養(yǎng)基，如MH瓊脂、營養(yǎng)瓊脂可用高壓滅菌，即121℃15min ；而含糖的培養(yǎng)基則以108℃滅菌為好，以防止糖類破壞。不耐高熱的物質(zhì)如血清、牛乳等，可采用間隙滅菌法滅菌。
（5）分裝：根據(jù)使用的目的和要求決定分裝量。分裝培養(yǎng)基所用的平皿、試管要求清潔，不殘留酸堿；制備平板培養(yǎng)基時，操作臺要水平，以避免瓊脂平板厚薄不一，同時確保無菌操作。
二、配制后質(zhì)量控制
（1）培養(yǎng)基外觀情況：包括顏色、透明度、有無沉淀和凝固。如發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基表面有裂紋或與培養(yǎng)皿的邊緣分離，說明培養(yǎng)基有脫水現(xiàn)象，必須丟棄。
（2）無菌試驗：每一批配好的培養(yǎng)基均須進行無菌試驗。先滅菌后分裝的培養(yǎng)基，可采用抽樣方法試驗，少于100個樣本通常選取5％～10％的量，如果配制大量培養(yǎng)基，則任意選取10 個培養(yǎng)基；無菌分裝培養(yǎng)基則需全部做無菌試驗。樣本在35 ℃ 或其他適宜的溫度下隔夜培養(yǎng)，如培養(yǎng)基含有血液，則需再置于室溫1天，以檢查嗜冷菌。選擇性培養(yǎng)基因含有抑制物質(zhì)，能抑制許多微生物，因此，可加入10倍量的無菌液體培養(yǎng)基，稀釋抑制物質(zhì)，以利于檢出污染菌。即使做過無菌試驗，接種時，也要檢查每個平板上的可見菌落。
（3）性能測試：每一批新制或新購的培養(yǎng)基，使用前均須取已知性質(zhì)的庫存菌種進行性能測試。培養(yǎng)基按目的不同可分為、分離培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。
①：接種少量難以生長的細菌，在一定時間內(nèi)觀察增菌情況，細菌能生長的最小接種濃度越小，說明性能愈好。
②分離培養(yǎng)基：要求目的菌生長良好，非目的菌被抑制。一般要求生長的目的菌接種量不可過多，較好的方法是將測試菌調(diào)成0．5麥氏濁度的菌懸液，再用0.001ml的標準接種環(huán)涂劃在培養(yǎng)基上，觀察菌落生長。
③鑒定培養(yǎng)基：應(yīng)選擇具有典型特征的菌株作性能試驗。如三糖鐵瓊脂，須用弗勞地枸櫞酸桿菌、福氏志賀菌及銅綠假單胞菌3種菌分別接種3支培養(yǎng)基，若反應(yīng)結(jié)果為斜面產(chǎn)酸／高層產(chǎn)酸、硫化氫陽性，斜面產(chǎn)堿／高層產(chǎn)酸，斜面產(chǎn)堿／高層產(chǎn)堿，質(zhì)量才算合格。
試劑、染色液和血清質(zhì)量控制
一、試劑
各種試劑配好后，均應(yīng)注明試劑名稱、配制日期、有效期及配制者，并作記錄，商品試劑亦應(yīng)注明購入日期及有效期。配制好的試劑均應(yīng)用標準菌株作性能測試，不合格者不能使用。性能測試間隔可根據(jù)試劑的穩(wěn)定性和使用頻率而定，如氧化酶試劑每天用前測試，靛基質(zhì)試劑每周測試1 次。試劑須根據(jù)不同要求作適當(dāng)?shù)馁A存，如氧化酶試劑應(yīng)置棕色瓶中4 ℃冰箱保存。
二、染色液
常用染色液如在每次配制后并常規(guī)至少每周檢測1次，用標準菌株（ATCC25923）和大腸埃希菌（ATCC 25922）作陽性和陰性檢測。不常用染色液（如鞭毛染色液）應(yīng)于每次使用前，用已知特征的菌株作檢測。
3.診斷血清
診斷血清的使用和保存必須按說明要求執(zhí)行，一般置4℃冰箱貯存，且不得暴露室溫過久；使用前應(yīng)注意有效期及效價，次使用抗血清時應(yīng)用相應(yīng)的菌株檢查其有效性，以后每月檢測1次。如抗血清出現(xiàn)任何顏色的改變或混濁，即不能使用。
微生物檢驗標本及檢驗結(jié)果質(zhì)量控制
一、微生物檢驗標本質(zhì)量控制
正確采集和處理標本是實驗室檢查獲得正確結(jié)果的前提，目前仍有不少實驗室和檢驗人員對檢驗標本分析前質(zhì)量控制的重視不夠。對標本采集方法和時間、標本來源，實驗室人員雖然不能直接控制，但有責(zé)任人員正確采集標本，可采取集中講課、個別輔導(dǎo)作取標本示教等方式給予指導(dǎo)。同時控制影響檢驗質(zhì)量的其他因素，如檢驗標本的運送、儲存和處理等，均應(yīng)統(tǒng)一按正確的操作規(guī)程執(zhí)行。
二、微生物檢驗結(jié)果質(zhì)量控制
1.檢驗結(jié)果報告
微生物學(xué)檢驗結(jié)果報告單是反映微生物學(xué)檢驗水平的重要依據(jù)之一。報告單填寫要準確、規(guī)范，將微生物學(xué)檢驗技術(shù)上的新進展充分反映在報告單上，如細菌名的更改，新的耐藥原因?qū)е碌乃幟艚Y(jié)果修正等。每一份報告單發(fā)出前都要由專人審核，包括檢查項目是否遺漏、結(jié)果有無明顯錯誤、字跡是否清楚、檢驗者有無蓋章簽名等。核對后蓋上審核章，才能將報告單正式發(fā)出。同時，微生物學(xué)實驗室應(yīng)實行分級報告制度，將標本顯微鏡檢查的初級結(jié)果報告生產(chǎn)部門，并進行初級試驗，為早期解決質(zhì)量問題提供依據(jù)。
2.檢驗結(jié)果記錄
實驗室應(yīng)制定實驗結(jié)果登記制度和原始記錄，包括取樣資料，細菌的分離、鑒定及培養(yǎng)結(jié)果，培養(yǎng)基和試劑的配制記錄。以備產(chǎn)品檢驗報告單遺失或結(jié)果有疑問時查考。詳細的結(jié)果記錄，有利于定時統(tǒng)計、分析和總結(jié)產(chǎn)品感染菌的類型及其他情況，及時通報其他部門，指導(dǎo)生產(chǎn)原料的使用和采購。