超聲波細(xì)胞破碎儀(粉碎機(jī)):是一種利用強(qiáng)超聲在液體中產(chǎn)生空化效應(yīng),對(duì)物質(zhì)進(jìn)行超聲處理的多功能、多用途的儀器,能用于多種動(dòng)植物細(xì)胞、病毒細(xì)胞的破碎,同時(shí)可用來乳化、分離、勻化、提取、消泡、清洗及加速化學(xué)反應(yīng)等等。被廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、微生物學(xué)、藥物化學(xué)、表面化學(xué)、物理學(xué)、動(dòng)物學(xué)等領(lǐng)域。
本儀器功能全,外觀美,性能可靠。儀器采用大屏幕顯示,微機(jī)集中控制,超聲時(shí)間,功率任意設(shè)定,樣品溫度檢測顯示、頻率微機(jī)跟蹤、故障自動(dòng)報(bào)警,所有功能都顯示在液晶大屏幕中。
名稱:S-JY96-IIN帶溫控超聲波細(xì)胞破碎儀(2-150W) 型號(hào):S-JY96-IIN
■ 用于動(dòng)植物細(xì)胞、細(xì)菌、芽孢或組織的粉碎,從細(xì)胞中提取蛋白質(zhì)以及進(jìn)行病毒、疫苗的科學(xué)培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。
■ 加速化學(xué)、物理學(xué)等的反應(yīng)速度和加速液體脫氣。
■ 原油稀釋、油水乳化、加速脫晶,玻璃均漿等進(jìn)行的科研分析。
■ 分散稀土,各類無機(jī)礦物質(zhì),以及配制近納米百分之一的乳膠體均化混合物等。
■ 模具微孔,盲孔的快速強(qiáng)力高精洗液。
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1、了解超聲細(xì)胞破碎的基本原理
2、掌握超聲細(xì)胞破碎的基本技術(shù)
實(shí)驗(yàn)原理
強(qiáng)聲波作用溶液時(shí),氣泡產(chǎn)生、長大和破碎的空化現(xiàn)象有關(guān),空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪刀力使細(xì)胞裂解。
材料和試劑
細(xì)菌10ml、燒杯、刨冰、75%酒精棉球。
探頭型號(hào)大小 破碎細(xì)胞容量
2mm--------------------------------------150ul-5ml
3mm--------------------------------------200ul-10ml
6mm--------------------------------------10ml-50ml
10mm--------------------------------------50ml-150ml
■ 功率:2-150W(1%-99%)可調(diào)
■ 破碎容量:0.5-150ML(需選配相應(yīng)的變幅桿)
■ 溫控范圍:室溫-90度(可選配低溫恒溫)
■ 隨機(jī)變幅桿:Φ6
型號(hào) S-JY96-IIN 顯示方式 液晶顯示 單次超聲時(shí)間 0.1-9.9S 單次間隙時(shí)間 0.1-9.9S 總工作時(shí)間 1-999M 頻率 20-25KHz 功率 2-150W(1%-99%)可調(diào) 破碎容量 0.5-200ML(需選配相應(yīng)的變幅桿) 溫控范圍 室溫-90度(可選配低溫恒溫) 報(bào)警功能有 溫度、時(shí)間、過載、空載 隨機(jī)變幅桿 Φ6 可選配變幅桿 Φ2、3、8 占空比 0.1-99.9% 電源 220V±5%/ 50Hz(可定制110V) 電源箱+換能器重量 16kg 電源機(jī)箱尺寸及凈重 40×28×22(CM);14kg 外主機(jī)包裝尺寸 53×30×42CM(長*寬*高) 外隔音箱包裝尺寸 35×35×52CM(長*寬*高) 隨機(jī)變幅桿 Φ6
細(xì)胞破碎的方法:
一、機(jī)械破碎法:是指利用搗碎機(jī)、研磨器或勻漿器 等將細(xì)胞破碎開來 。
1. 高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內(nèi)約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調(diào)速器先撥至最慢處,開動(dòng)開關(guān)后,逐步加速至所需速度。此法適用于動(dòng)物內(nèi)臟組織、植物肉質(zhì)種子等。
2. 玻璃勻漿器勻漿:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動(dòng),即可將細(xì)胞研碎,此法細(xì)胞破碎程度比高速組織搗碎機(jī)為高,適用于量少和動(dòng)物臟器組織。
二、物理破碎法:指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細(xì)胞破碎開來。
1:用一定功率的超聲波處理細(xì)胞懸液,使細(xì)胞急劇震蕩破裂(借助超聲的震動(dòng)力破碎細(xì)胞壁和細(xì)胞器)。
機(jī)制:可能與強(qiáng)聲波作用溶液時(shí),氣泡產(chǎn)生、長大和破碎的空化現(xiàn)象有關(guān),空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪刀力使細(xì)胞裂解。
超聲波破碎的效率取決于聲頻、聲能、處理時(shí)間、細(xì)胞濃度和細(xì)胞類型等。(使用時(shí)注意降溫,防止過熱)。
2. 高壓破碎:細(xì)胞懸浮液從高壓室的環(huán)狀隙噴射到靜止的撞擊環(huán)上,被迫改變方向經(jīng)出口管流出。此過程中細(xì)胞經(jīng)歷了高速造成的剪切的碰撞及高壓到常壓的變化,從而破碎釋放內(nèi)含物。
這是一種溫和的、破碎細(xì)胞的較理想的方法。
3. 反復(fù)凍融法:將細(xì)胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復(fù)幾次,由于細(xì)胞內(nèi)冰粒形成和剩余細(xì)胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細(xì)胞結(jié)構(gòu)破碎。
三、化學(xué)破碎法:指利用甲醛、丙酮等有機(jī)溶劑或表面活性劑作用于細(xì)胞膜,使細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)遭到破壞或透性發(fā)生改變 。
有些動(dòng)物細(xì)胞,例如腫瘤細(xì)胞可采用十二烷基磺酸鈉(SDS)、去氧膽酸鈉等細(xì)胞膜破壞。濃度一般為1mg/ml。
四、酶學(xué)破碎法 :選用合適的酶,使細(xì)胞壁遭到破壞,進(jìn)而在低滲溶液中將原生質(zhì)體破碎開來。
細(xì)菌細(xì)胞壁較厚,可采用處理效果更好。
裂解液標(biāo)準(zhǔn)配方: 50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml。(在這個(gè)pH范圍內(nèi)比較好發(fā)揮作用) 。
綜合敘述:無論用哪一種方法破碎組織細(xì)胞,都會(huì)使細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)或核酸水解酶釋放到溶液中,使大分子生物降解,導(dǎo)致天然物質(zhì)量的減少,加入二異丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或減慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入苯化物(PMSF)也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且應(yīng)該在破碎的同時(shí)多加幾次;另外,還可通過選擇pH、溫度或離子強(qiáng)度等,使這些條件都要適合于目的物質(zhì)的提取。
使用前注意事項(xiàng):
1.根據(jù)所處理的樣本體積選擇適當(dāng)探頭,使用前后均須用酒精棉球擦洗探頭,換探頭須剛專用扳手更換;
2.AMPLITUDE旋鈕打開時(shí),探頭不得在空氣中暴露,特殊情況下(測試探頭)不應(yīng)超過10秒;
3.使用前準(zhǔn)備好冰盒,樣品處理時(shí)必須置于冰浴中,樣品濃度不可過大。