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人肝星形細胞

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產(chǎn)品型號lx-2

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廠商性質(zhì)0

所在地武漢市

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更新時間：2022-06-21 13:48:13瀏覽次數(shù)：608次

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細胞系

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智立中特（武漢）生物科技有限公司

經(jīng)營模式：

商鋪產(chǎn)品：9條

所在地區(qū)：湖北武漢市

聯(lián)系人：王麗偉（銷售）

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產(chǎn)品簡介

產(chǎn)地	國產(chǎn)	規(guī)格	支
級別	其他

lx-2人肝星形細胞
細胞名稱：lx-2人肝星形細胞

　　平臺編號:zl-056855

　　細胞介紹

　　該細胞系由發(fā)表該細胞文章的作者命名，這個細胞又叫LiemingXu-2，這是一個永生化的細胞。

詳細介紹

　lx-2人肝星形細胞

一．細胞簡介：

　　細胞名稱：lx-2人肝星形細胞

　　平臺編號:zl-056855

　　細胞介紹

　　該細胞系由發(fā)表該細胞文章的作者命名，這個細胞又叫LiemingXu-2，這是一個永生化的細胞。

　　細胞特性

　　1）來源：肝

　　2）形態(tài)：星狀細胞，貼壁生長

　　3）含量：>1x106細胞數(shù)

　　4）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

　　5)用途：僅供科研使用。

　　二．　lx-2人肝星形細胞細胞的培養(yǎng)：

　　1）準備1640培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗，1%。

　　2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

　　3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

　　三．　lx-2人肝星形細胞細胞處理：

　　1）凍存細胞的復蘇：

　　將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL*培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，*培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml*培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

　　2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

　　對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

　　1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

　　2.加入0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53mMEDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

　　3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

　　3）細胞凍存:收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

　　下面T25瓶為例；

　　1.細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數(shù)板計數(shù)，來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.

　　2.1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞，按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

　　3.將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。

　　四、運輸和保存

　　干冰運輸及復蘇好存活細胞

　?。?）1mL凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。

　?。?）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

　　五、細胞接收后的處理

　　1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系質(zhì)粒載體網(wǎng)。

　　2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

　　3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的*培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

　　4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代。

　　智立中特（武漢）生物科技有限公司是一家集生物研發(fā)，生產(chǎn)，銷售，售后為一體的*產(chǎn)業(yè)公司。擁有載體質(zhì)粒，載體，國內(nèi)外微生物菌種資源，感受態(tài)細胞，培養(yǎng)基，細胞株等廣泛的生產(chǎn)銷售線。

　　質(zhì)粒載體產(chǎn)品：

　　提供各種類型載體宿主，基因種屬類型，抗性，設計并構(gòu)建質(zhì)粒：大腸桿菌表達載體；哺乳動物表達載體；酵母表達載體；昆蟲表達載體；植物表達載體；廣;腺病毒載體...常用有pACYC184；pACYCDuet-1；pASK-IBA5plus+FUS(人基因）；pAX01；pBABE-Puro；pBAD24

　　pBI121；pBIFC-bFosVC155；pBIFC-VC15；pCDFDuet-1；pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro；pCDH-CMV-MCS-EF1-CopGFP-T2A-puro；pBIFC-VN155(I152L)addgene27097；pCDH-MSCV-MCS-EF1-copGFP-T2A-Puro；pCAGGS；pBiFC-VN173(Plasmid#22010)；pBlueScriptSK(+)；pBlueScriptIISK(+)；pBV220；pCas；pCas9

　　pBR322；pBT3-STE；pBudCE4.1以及結(jié)合轉(zhuǎn)移質(zhì)粒RP4；pGL4.25[luc2CP/minP];pGR106;pIRES2-AcGFP1-Nuc;psfGFP;pHEN1;pNL1.1[Nluc];pBBR1-GFP；pBMTB-5;pBMTB-4;pBMTB-3;pBMTB-2;pCAMBIA0305.1;pCX-DR;;pGreenII0800-miRNA;pK7GWIWG2(I);pRARE;pDG1663

　　質(zhì)粒菌種產(chǎn)品：

　　E.coliNissle1917；USA300：大腸桿菌JM108；希瓦氏菌屬MR-1；E.coliW3110野生型；釀酒酵母W303a；釀酒酵母invsc1；釀酒酵母BY4741；釀酒酵母BY4742；畢赤酵母SMD1168H；PseudomonasputidaKT2440；E.coliMC1061；枯草芽孢桿菌WB800；根癌農(nóng)桿菌EHA105；根癌農(nóng)桿菌GV3101；CEN.PK2-1D；CEN.PK2-1C；全耐藥鮑曼不動桿菌；哈維弧菌BB170

　　菌種產(chǎn)品：

　　提供模式菌種，科研菌種，普通菌種等菌種資源，有證質(zhì)控樣品等微生物標準品，芽孢懸液。常用藥典菌種如：大腸埃希氏菌CMCC（B）44102、黑曲霉CMCC（F）98003,白色念珠菌CMCC(F)98001,枯草芽孢桿菌CMCC（B）63501,銅綠假單胞菌CMCC（B）10104,生孢梭菌CMCC（B）64941;常用益生菌：長雙歧桿菌（Bifidobacteriumlongum）,嗜熱鏈球菌（Streptococcusthermophilus），鼠李糖乳桿菌（Lactobacillusrhamnosus），類干酪乳桿菌（Lactobacillusparacasei），干酪乳桿菌（Lactobacilluscasei）；常用真菌：松口蘑Tricholomamatsutake，灰葡萄孢bio-81601cfcc50437Botrytiscinerea；靈芝，香菇，茯苓等

　　原代細胞和細胞系產(chǎn)品：

　　現(xiàn)取不同組織現(xiàn)分：不同來源人/鼠/兔/豬等不同組織如肺、氣管、支氣管、甲狀腺、胰腺、垂體、腎上腺、扁桃體、胸腺、腎、膀胱、輸尿管、前列腺、心臟、血管。常用原代細胞有：氣管上皮細胞；前列腺上皮細胞；膀胱上皮細胞；輸尿管上皮細胞；腎足細胞；內(nèi)皮祖細胞；輸卵管上皮細胞；乳腺上皮細胞

　　公司提供細胞系人源做過STR鑒定，其他做過種屬鑒定，確保產(chǎn)品無誤后方可提供客戶，形式凍存或復蘇節(jié)省客戶時間；確保實驗順利。常用細胞系有：WB-F344細胞；RG2[D74]細胞；NRK細胞；A7r5細胞；L6細胞；UMNSAH/DF-1細胞；MDBK(NBL-1)細胞；MDBK細胞；CCC-SMC-1細胞；PtK1(NBL-3)細胞；Mv1Lu細胞；Mv.1.Lu(NBL-7)細胞；F81細胞；CRFK細胞；MLTC-1細胞；MS1細胞；C3H/10T1/2,Clone8細胞；GL261細胞；P3X63Ag8.653細胞；HCC38細胞；ZR-75-30細胞；SK-LU-1細胞；NCI-H2087細胞；SK-N-MC細胞；Hs895.T細胞