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南京江苑生物科技有限公司
產地 | 國產 | 規(guī)格 | 10? cells |
---|---|---|---|
級別 | 其他 |
293T,HEK-293T,人胚腎細胞:人胚腎細胞株293插入SV40 T-抗原基因后產生的高轉染效率的衍生株稱為293T。該細胞最初的名字293tsA1609neo,攜帶SV40復制序列,被廣泛用于逆轉錄病毒生產、基因表達和蛋白表達。
細胞簡介
人胚腎細胞株293插入SV40 T-抗原基因后產生的高轉染效率的衍生株稱為293T。該細胞最初的名字293tsA1609neo,攜帶SV40復制序列,被廣泛用于逆轉錄病毒生產、基因表達和蛋白表達。
運輸和保存
1.1 mL凍存管包裝干冰運輸,收貨后-80℃冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇。若發(fā)現干冰已經揮發(fā)干凈、凍存管蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。
2.T25瓶培養(yǎng)的細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
培養(yǎng)信息
細胞名稱 | 293T,HEK-293T,人胚腎細胞 |
別稱 | Hek293T; HEK-293T; HEK 293T; HEK-293-T; HEK 293 T; 293-T; 293 T; 293T; Human Embryonic Kidney 293T; 293tsA1609neo |
種屬來源 | Homo sapiens, human |
組織來源 | kidney; Embryo |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
生長特性 | 貼壁生長 |
生物安全等級 | 1級 |
傳代比例 | 1:3-1:5 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長培養(yǎng)基 | 10% FBS、高糖DMEM、1% Penicillin-Streptomycin |
培養(yǎng)條件 | 氣相:95% 空氣、5% CO2;溫度:37℃ |
凍存條件 | 90% FBS + 10% DMSO;液氮 |
支原體檢測 | 陰性 |
STR鑒定結果 | D5S818: 8,9 D13S317: 12,14 D7S820: 11 D16S539: 9,13 vWA: 16,19 THO1: 7,9.3 Amelogenin: X TPOX: 11 CSF1PO: 11,12 |
培養(yǎng)注意事項
1.293T貼壁能力較弱,加液、換液、洗滌時,須動作輕柔,避免用液體直沖細胞,會造成細胞脫落。細胞生長不能過密,過密細胞容易脫落,脫落下來的細胞可以通過離心收集,消化后繼續(xù)培養(yǎng)。
2.293T細胞狀態(tài)直接影響病毒包裝效率。當細胞傳代次數過多、細胞增殖速度減緩、細胞貼壁能力非常弱(輕柔換液也能導致細胞半數脫落)時,說明細胞狀態(tài)不好,會大幅降低病毒包裝效率。
3.使用高糖DMEM培養(yǎng)293T,低糖DMEM或者DMEM/F12等含糖量低的培養(yǎng)基可能影響293T細胞的生長狀態(tài)。
4.如果發(fā)生293T細胞不貼壁,漂浮在培養(yǎng)基中的現象,請確認所使用的DMEM中 NaHCO?濃度及培養(yǎng)箱中CO2濃度。并參考以下培養(yǎng)體系:
① DMEM由1.5 g/L NaHCO? 配制而成,使用5% CO2培養(yǎng)箱。
② DMEM由3.7 g/L NaHCO?配制而成,使用10% CO2培養(yǎng)箱。
當使用 NaHCO?含量高的培養(yǎng)基時,必須將這些細胞在10% CO2中孵育,以便正確緩沖培養(yǎng)基。當培養(yǎng)基沒有適當緩沖時,293T細胞雖然可以存活,但將無法粘附并保持漂浮在培養(yǎng)基中。
5.培養(yǎng)時可酌情使用預鋪0.2%明膠的培養(yǎng)瓶/培養(yǎng)皿,若細胞狀態(tài)好,可省略此步驟。
6.本細胞僅用于科學研究,不得用于臨床治療。
7.請注意無菌操作,避免污染。
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