螢火蟲熒光素酶輝光檢測試劑盒的特點(diǎn):
•靈敏—對螢火蟲熒光素酶活性進(jìn)行高度靈敏的檢測;為了獲得較好結(jié)果(較大信號),請與 Pierce 螢火蟲熒光素酶信號增強(qiáng)劑配合使用
• 穩(wěn)定—與閃光測定相比,信號穩(wěn)定性更高
• 簡單—不需要使用配備進(jìn)樣器的光度計
• 兼容—與其他螢火蟲甲蟲熒光素酶兼容的測定試劑
• 適合自動化—適合用于高通量測定
• 便利—包含一種通用的細(xì)胞裂解緩沖液和經(jīng)過優(yōu)化的輝光測定試劑
• 安全—允許用戶執(zhí)行非放射性測定
該 Pierce 熒光素酶輝光檢測試劑盒包含的試劑用于測定細(xì)胞裂解物中螢火蟲熒光素酶的活性。在螢火蟲熒光素酶存在的情況下,輝光試劑提供穩(wěn)定的生物發(fā)光信號,非常適合不帶進(jìn)樣器的光度計或用于樣品批量處理。熒光素酶反應(yīng)產(chǎn)生的光輸出可與生成的熒光素酶蛋白的量相關(guān),后者又與驅(qū)動熒光素酶表達(dá)的啟動子的活性成正比。這些輝光測定試劑經(jīng)過了優(yōu)化,可以為 Thermo Scientific 螢火蟲 Luc 質(zhì)粒提供較好結(jié)果;但是,閃光分析試劑盒可用于檢測采用 D-熒光素作為底物的其他螢火蟲或 ATP 依賴性熒光素酶的活性。
包括:
細(xì)胞裂解緩沖液、反應(yīng)緩沖液和底物;需單獨(dú)購買熒光素酶信號增強(qiáng)劑。
需要:
• 螢火蟲熒光素酶和光度計或其他能夠監(jiān)測發(fā)光的儀器(如 Thermo Scientific Luminoskan Ascent 和 Varioskan 閃光微孔板讀數(shù)儀)。
•為了獲得較好結(jié)果(較大信號),請與 Pierce 螢火蟲熒光素酶信號增強(qiáng)劑配合使用
應(yīng)用:
• 用于分析順式調(diào)節(jié)元素和反式作用因子的啟動子研究
• 藥物篩選
• siRNA 和 miRNA 篩選
• 研究脫靶效應(yīng)的多通路測定
• 蛋白定位報告基因測定
• 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路分析
• RNA 剪接研究
螢火蟲熒光素酶是由甲蟲螢科家族的多個種屬(包括 Photinus 屬和螢屬)天然產(chǎn)生的一種 60kDa 蛋白。螢火蟲熒光素酶的生物發(fā)光信號源自 D-熒光素的氧化。熒光素酶反應(yīng)產(chǎn)生的光輸出將使用光度計進(jìn)行捕獲,可與生成的螢火蟲熒光素酶蛋白的量相關(guān),并可用于確定驅(qū)動螢火蟲表達(dá)的啟動子的活性。天然螢火蟲熒光素酶產(chǎn)生了快速衰變的強(qiáng)烈的閃光信號。使用 Pierce 螢火蟲輝光檢測試劑盒產(chǎn)生的信號更穩(wěn)定,并且衰變得非常慢,因此無需使用配備進(jìn)樣器的光度計。