● 微生物總數(shù)測定
● 致病菌快速定性
● 檢測結(jié)果數(shù)據(jù)化,即時
● 無菌監(jiān)測分析,無需培養(yǎng)增菌(總數(shù)測定)
檢測范圍 1×10-18molATP/assay
檢測時間 機器默認(rèn)5秒(0.2~~100秒可調(diào))
試管尺寸 φ12×55mm
檢測模式 RLU、fg(細(xì)菌細(xì)胞ATP含量)
資料儲存 800個記憶存儲
屏幕顯示 LCD
電力 內(nèi)建Ni/Cd充電電池,外接電源
尺寸/重量 長208×寬105×93高(mm)/1.5kg
測量值 0—3.000.000RLU
精準(zhǔn)誤差 +/- 5%
ATP快速檢測原理
生物冷光試劑含有熒光素(luciferin)和熒光素酶(luciferase),其中熒光素酶會與ATP 結(jié)合并在氧分子存在下催化以下反映:
ATP法與傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)法比較
傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng) ATP法
使用方法 耗時費力 操作簡單且快速
操作程序 樣品含菌數(shù)不易掌控,因此常需要測定2至3個稀釋度 固體稀釋一個稀釋度
液體不需要稀釋
時效性 檢驗結(jié)果無法即時出來,缺乏時效性 可現(xiàn)場檢測,具有時效性
便攜式微生物ATP熒光檢測系統(tǒng)(System Pi - 102)
(產(chǎn)地:英國 Hygiena)
便攜式微生物ATP熒光檢測系統(tǒng)專用試劑
試劑盒包含:每套試劑盒可以完成150 -375次實驗(每瓶ATP Reagent HS可以完成25次管式照度計實驗或62.5次微板照度計實驗)
1. ATP Reagent HS(6小瓶):含有凍干熒光素酶和熒光素。熒光素酶參加反應(yīng)后大約每分鐘消耗6% 的ATP。
2. Diluent B 10 mL(6小瓶):用于重新調(diào)配ATP Reagent HS時的緩沖劑。
3. Extractant B/S 10 mL(1小瓶):提取劑
4. ATP standard 5 mL(1小瓶):ATP標(biāo)準(zhǔn)液,含有10-7mol/L的ATP。
5. ATP Eliminating Reagent(1小瓶):ATP消除劑。
6. Cell Lysing Reagent 10 mL(1小瓶):細(xì)胞裂解劑,用于重新調(diào)配ATP消除劑(ATP Eliminating Reagent)。
2. 3.
檢驗方法:
實驗前首先對細(xì)胞外ATP通過酶進行降解。然后使用Extractant B/S釋放細(xì)胞內(nèi)的ATP并通過酶阻止ATP的降解。最后加入ATP Reagent HS分析ATP。
通過照度計所測量的ATP與實際存在的ATP是成正比的。通過測量和比對加入一定量標(biāo)準(zhǔn)ATP之前和之后的結(jié)果,就可能計算出被測未知樣品的ATP含量以fg形式表示
檢驗步驟:
1) 取被檢樣品按國標(biāo)方法進行前處理。
2) 取處理后樣品50µL樣品和50µL ATP Eliminating Reagent于試管中,靜置10分鐘。
3) 直接加入50 µL Extractant B/S在試管中,之后確認(rèn)所有的ATP Eliminating Reagent都已經(jīng)和Extractant B/S進行了反應(yīng),
4) 加入0.4 mL ATP Reagent HS并進行測量光照度Ismp。
5) 加入10 µL 100 nmol/L ATP Standard,i.e. 1 pmol ATP,再測量其光照值,Ismp+std。
6) 儀器自動換算fg值
重要說明:
1. 固型食品在檢測前均按國標(biāo)方法進行前處理
2. 所有固體被檢樣液均使用10倍稀釋液
• 液體不稀釋,飲用水不用消去素(ATP Eliminating Reagent)
3. 如果fg值非常高,可能樣品中游離ATP過高,重做試驗,可用100倍稀釋,測得fg值乘以10,或加入更多的消去素
4. 樣液均為50uL
5. 儀器計算出的fg 為20℃時,一個細(xì)菌ATP的含量(大約)
6. 以細(xì)菌個數(shù)估算菌落數(shù),并參照國標(biāo)制定 (滿意 可接受 不滿意)的臨界值
符合的國際標(biāo)準(zhǔn)
SYSTEM PI – 102
便攜式微生物ATP熒光快速檢測系統(tǒng)