齊一生物低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)檢測試劑盒 齊一生物科技(上海)有限公司試劑種類眾多:覆蓋分析化學(xué)品,無機化學(xué)品,有機化學(xué)品,生物化學(xué)品,材料化學(xué)品.試劑信息齊全:包含試劑特性描述,詳細(xì)質(zhì)量信息,應(yīng)用方法、標(biāo)準(zhǔn),用途以及正在開發(fā)的前沿應(yīng)用.齊一生物科技(上海)有限公司: 60348496.www.qiyibio。。com
齊一生物低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)檢測試劑盒樣品處理程序(樣品在提取過程中,要嚴(yán)格按說明書操作,提取過程中應(yīng)準(zhǔn)確稀釋,否則會出現(xiàn)結(jié)果不準(zhǔn)確,樣品應(yīng)當(dāng)保存在陰涼避光之處及冷藏保存)
8.1取10g粉碎的樣品,加 20ml 70%甲醇溶液
8.2強力振蕩3分鐘
8.3用Whatman 濾紙過濾
8.4取100μl處理后的樣品,加入400μl樣本稀釋液
8.5取50μl稀釋液進行分析(稀釋倍數(shù)10)
9 酶免分析步驟
9.1 實驗須知
9.1.1 實驗開始前請將所有試劑于盒外充分恢復(fù)室溫(25±2℃),時間約2小時?;販厥覝兀?5±2℃)后再取出微孔條,多余的微孔條重新密封立即于2~8℃干燥保存
注:一定保證回溫充分,否則影響檢測的精確度和準(zhǔn)確度。
9.1.2 使用后請立即將試劑放回2~8℃保存
9.1.3 請不要改變分析程序
9.1.4 請使用精確的微量移液器
9.1.5 操作一旦開始,請不要中斷任何程序
9.1.6 ELISA結(jié)果的可重復(fù)性極大程度的取決于操作程序,請嚴(yán)格按照要求操作
9.1.7 為避免交叉污染,每個標(biāo)準(zhǔn)品和樣品均應(yīng)使用不同的吸頭加樣
9.1.8 加樣時請勿讓吸頭接觸微孔中的溶液或內(nèi)表面
9.2 分析步驟
9.2.1 預(yù)先進行編號,標(biāo)記B0、標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置,推薦進行雙孔檢測
9.2.2 取所需數(shù)量的微孔(微孔條可拆),將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存
9.2.3 樣品稀釋液(10×)、濃縮洗滌液(20×)稀釋成工作液(蒸餾水或去離子水稀釋)
9.2.4 在B0孔中加入50μl0.0 ng/ ml標(biāo)準(zhǔn)品溶液
9.2.5 在各標(biāo)準(zhǔn)孔中加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液
9.2.6 在各樣品孔中加入50μl樣品溶液
9.2.7 在所有孔中加入50μl的抗本產(chǎn)品抗體酶結(jié)合物
9.2.8 輕輕晃動反應(yīng)板幾秒鐘。
9.3 37℃溫浴30min (溫浴過程中不時輕拍反應(yīng)板,可以減少雙孔誤差)
9.3.1 甩掉孔中液體,用洗液洗滌微孔板5次,zui后一次應(yīng)在吸水紙上拍打以*除去孔中液體。
9.4 反應(yīng)
9.4.1 洗滌程序完成后,立即用微量移液器在每個微孔中先加入50μl顯色液A,再加 50μl顯色液B;輕微晃動反應(yīng)板使之*混勻
9.4.2 37℃溫浴10min
9.4.3 每孔中加入50μl終止液,混勻
9.4.4 在450nm下檢測吸光度,結(jié)果在5min內(nèi)讀取。HPTS [8-Hydroxypyrene-1,3,6-trisulfonic acid, trisodium salt] 8-羥基芘-1,3,6-三磺酸三鈉鹽 1 g 6358-69-6
5-(and-6)-Carboxy-2',7'-dichlorofluorescein *Mixed isomers* 5-(6)-羧基-2',7'-二氯熒光素(混合物) 100 mg 111843-78-8
BCECF acid [2',7'-bis-(2-carboxyethyl)-5-(and-6)-carboxyfluorescein] *mixed isomers* 2',7'-二-(2-羧乙基)-5(6)-羧基熒光素(混合物) 1 mg 85138-49-4
BCECF, AM [2',7'-bis-(2-carboxyethyl)-5-(and-6)-carboxyfluorescein, acetoxymethyl ester] 2',7'-二-(2-羧乙基)-5(6)-羧基熒光素乙酰甲酯 1 mg 117464-70-7
BCECF, AM [2',7'-bis-(2-carboxyethyl)-5-(and-6)-carboxyfluorescein, acetoxymethyl ester] *5mM solution in anhydrous DMSO* 2',7'-二-(2-羧乙基)-5(6)-羧基熒光素乙酰甲酯(5mM 無水DMSO溶液) 50 μL 117464-70-7
5-(and-6)-Carboxy SNARF-1 5(6)-羧基SNARF-1 1 mg 126208-12-6
5-(and-6)-Carboxy SNARF-1, Acetoxymethyl Ester, Acetate 5(6)-羧基SNARF-1, 乙酰甲酯, 乙酸酯 1 mg 126208-13-7
5-(and-6)-Carboxy SNARF-1, Acetoxymethyl Ester, Acetate *5mM solution in anhydrous DMSO* 5(6)-羧基SNARF-1, 乙酰甲酯, 乙酸酯(5mM 無水DMSO溶液) 50 μL 126208-13-7
BAPTA, AM 胞內(nèi)鈣掩蔽BAPTA, AM 25 mg 126150-97-8
BAPTA, tetrapotassium salt BAPTA 四鉀鹽 1 g
BAPTA, tetrasodium salt BAPTA 四鈉鹽 1 g
EGTA tetrasodium salt EGTA 四鈉鹽 1 g
Quin-2, AM 胞內(nèi)鈣掩蔽Quin-2, AM 5 mg 83104-85-2
Quin-2, tetrapotassium salt Quin-2 四鉀鹽 5 mg
Fluo-3, AM 鈣熒光探針Fluo-3, AM 100 μg 121714-22-5
Fluo-3, AM 鈣熒光探針Fluo-3, AM 1 mg 121714-22-5
Fluo-3, AM 鈣熒光探針Fluo-3, AM 10×100 μg 121714-22-5
MEQ [6-Methoxy-N-ethylquinolinium iodide] MEQ 100 mg 34373-76-7
SPQ [6-Methoxy-N-(3-sulfopropyl)quinolinium] SPQ 50 mg
MQAE [N-(Ethoxycarbonylmethyl)-6-methoxyquinolinium bromide] MQAE 100 mg
Lucigenin [Bis-N-methylacridinium nitrate] N,N二甲基二吖啶硝酸鹽;光澤精 10 mg 2315-97-1
TSQ [N-(6-Methoxy-8-quinolyl)-p-toluenesulfonamide] TSQ 25 mg
Calcein 鈣黃綠素;二[N,N-二羧甲基氨甲基]熒光素 10 mg 1461-15-0
Calcein blue 鈣黃綠素藍(lán);8-[N,N-二(羧甲基)氨甲基]-4-甲基傘形酮 25 mg 54375-47-2
DiBAC4(5) [Bis-(1,3-dibutylbarbituric acid)pentamethine oxonol] DiBAC4(5) 25 mg 63560-89-4
DiBAC4(3) [Bis-(1,3-dibutylbarbituric acid)trimethine oxonol] DiBAC4(3) 25 mg 70363-83-6
DiSBAC2(5) [Bis-(1,3-diethylthiobarbituric acid)pentamethine oxonol] DiSBAC2(5) 25 mg
DiSBAC2(3) [Bis-(1,3-diethylthiobarbituric acid)trimethine oxonol] DiSBAC2(3) 25 mg
Oxonol V [Bis-(3-phenyl-5-oxoisoxazol-4-yl)pentamethine oxonol] Oxonol V 25 mg 61389-30-8
Oxonol VI [Bis-(3-propyl-5-oxoisoxazol-4-yl)pentamethine oxonol] Oxonol VI 25 mg 64724-75-0